Proteolisi limitata

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Autore

Discussione

joleee80
Nuovo Arrivato

Prov.: Napoli
Citt�: napoli

24 Messaggi

Inserito il - 28 febbraio 2007 : 22:31:13

Ciao a tutti.....qualcuno mi pu� aiutare???
Avrei bisogno di informazioni sulle proteasi, in particolare... Proteinasi K, Termolisina, Subtilisina....sul sito di taglio e il meccanismo di taglio....devo effettuare delle proteolisi limitate....Grazie se aveste del materiale mi sarebbe utile....

Ci� che mi nutre .......mi distrugge....

Marianna
Utente Junior

146 Messaggi

Inserito il - 01 marzo 2007 : 18:47:38

Cara Joleeee...io usavo la Proteinasi K x eliminare le proteine durante l'estrazione del DNA.

Ti posso dire quello ke so in merito..nn so se pu� esserti utile..

Sicuramente nn fa un taglio specifico..praticamente taglia ogni volta ke trova un aa alifatico o aromatico all'interno della proteina..quindi � un endopeptidasi..io la usavo concentrata 1.66 microgrammo/microlitro..e la preparavo in un tampone 2X contenente Tris 10m, EDTA 100mM, SDS 1%. Prima di aggiungerla al campione trattavo quest'ultimo con un tampone di aggiustamento e dopo il trattamento (solitamente a 55�C x 1h..xk� la proteinasi agisce solo ad alte T) addizionavo anke un tampone di aggiustamento post-PK.

PS: mi pare sia una serina proteasi..ma nn ne sono sicurissima.

Farah

Snake21
Nuovo Arrivato

Prov.: napoli
Citt�: trecase

4 Messaggi

Inserito il - 26 settembre 2008 : 11:19:03

Ciao a tutti..qualcuno pu� aiutarmi a capire come funziona una proteolisi limitata??ho letto varie cose ma nn mi � ancora chiara la tecnica...se qualcuno mi aiuta..grazie mille in anticipo..