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bamboladelsud
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11 Messaggi

Inserito il - 31 luglio 2014 : 13:21:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di bamboladelsud Invia a bamboladelsud un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve, avrei bisogno di un consiglio. Se volessi eseguire in un'unica volta l'amplificazione di più sequenze, come faccio ad ottimizzare le condizioni in modo che tutti i primer funzionino alla stessa temperatura di annealing?
Io ho già i primer per i vari frammenti, ma con temperature di annealing che variano dai 55°C ai 60°C. Devo necessariamente scegliere altri primer o posso intervenire su altri fattori, affinché io possa utilizzare per tutti la stessa temperatura e lo stesso numero di cicli?

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1723 Messaggi

Inserito il - 01 agosto 2014 : 19:14:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:

Devo necessariamente scegliere altri primer o posso intervenire su altri fattori, affinché io possa utilizzare per tutti la stessa temperatura e lo stesso numero di cicli?


Devi disegnare dei nuovi primer con la stessa temperatura di annealing. L'alternativa è scegliere la temperatura più bassa, ma si possono creare degli amplificati aspecifici.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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