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mollichina di pane
Utente Junior

Miyu


121 Messaggi

Inserito il - 26 agosto 2014 : 11:44:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mollichina di pane Invia a mollichina di pane un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!
Dopo anni di silenzio eccomi tornata...
Ho un problema con la Real Time PCR. Aiuto!!!
Sto utilizzando il SyBr Green per la quantificazione relativa di alcuni geni su linee cellulari.
Il problema sono le curve di melting: nei pozzetti dei campioni ho prodotti specifici (es. Tm: 86░C con fluorescenza alta). Nei bianchi mi vengono dei picchi (es. Tm: 79░C con fluorescenza bassissima o quasi nulla) e alle volte anche doppi picchi.
Ho giÓ fatto delle prove per escludere che si trattasse di una contaminazione: uso punte con filtri e lavoro sotto cappa, ho cambiato l'acqua, la mix e fatto nuove aliquote di oligo.
Cosa ne pensate?
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