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Kika_Yeah
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
 Inserito il - 30 gennaio 2015 : 14:42:12
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Ciao!
Mi avvicino ora alla multiplex, ma ho tanti dubbi. Devo usare da 3 a 4 fluorocromi e nel pensare a come creare il mix di coppie di primer da impiegare per l'analisi di frammenti su sequenziatore non so come considerare il fluorocromo. Intendo dire che, normalmente, in singola PCR la concentrazione del fluorocromo si somma a quella del Primer F per raggiungere quella del primer R (se la concentrazione finale di utilizzo dei primer è 0,32ng, il primer R sarà inserito come 0.32 ng mentre tail e primer F con concentrazione ciascuno 0,16 in modo da raggiungere insieme 0.32 ng). Ma in multiplex? Nel creare il tubo con la mix dei primer dei vari loci devo inserire anche i fluorocromi insieme? E se si, come mi regolo con le concentrazioni?
Mi aiutate, please?
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Multiplex PCR con fluorocromi
Didattica
