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                       Inserito il - 18 febbraio 2015 :  15:26:44
                        
                        
                 
                        
                      
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                       Ciao a tutti! Per ottenere un animale CRE-lox, bisogna ottenere prima un animale "loxato" ed un animale "cre", che successivamente vengono fatti incrociare. Per ottenere un animale cre basta costruire un costrutto con promotore tessuto-specifico che si inserisce a caso nel genoma (quindi non mi preoccupo di dove si vada a mettere, tanto c'è il promotore specifico), mentre per creare un animale loxato, deve avvenire una ricombinazione omologa (visto che voglio eliminare l'esone fiancheggiato dai siti lox), ma cosa devo fare? Devo fare un knock-out, un knock-in, un transgene? Mi spiegate per favore?
  GRazie!!
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                       Inserito il - 18 febbraio 2015 :  19:52:23
                        
                        
                 
                        
                      
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                       Che io sappia (ma non l'ho mai fatto in pratica) si fa un knock-in dello stesso gene fiancheggiato da loxP.
  PS: si dice "floxato" (almeno, in inglese si dice "floxed"). | 
                     
                    
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                       Inserito il - 18 febbraio 2015 :  21:30:57
                        
                        
                 
                        
                      
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                       Quindi si fa un knock-in + un transgenico per poi ottenere un knock-out dopo incroci specifici. Giusto?
  Grazie! | 
                     
                    
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                       Inserito il - 21 febbraio 2015 :  01:33:10
                        
                        
                        
                 
                        
                      
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                       Per definizione un animale transgenico per la CRE è un knock-in, tutto ciò che si aggiunge ad un genoma deve essere considerato knock-in. La differenza sta nella tecnica di inserzione che può avvenire tramite random insertion o per gene targeting(che sfrutta quindi l' evento di ricombinazione omologa sito specifica) | 
                     
                    
                        "l'unica differenza tra me e un pazzo è che io non sono pazzo!" Salvador.Dalì
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