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Tag   western blot    mycobacterium    tecniche    microbiologia  Aggiungi Tag

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dinorega
Nuovo Arrivato



24 Messaggi

Inserito il - 12 marzo 2015 : 12:40:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di dinorega Invia a dinorega un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti ringrazio per la risposta in anticipo.
Devo preparare la mia tesi intotolata: localizzazione della proteina MSmeg_0412 in Mycobacterium Smegmatis tramite western blot.Avendo fatto il lab di tesi un po di tempo fa non ricordo con precisione le prime tappe dell esperimento.
Tramite clonaggio devo creare diversi ceppi:
1)Selvatico
2)Un ceppo con un plasmide privo del gene di interesse
3)Un ceppo con plasmide(dotato d inserto del gene 0412 senza segnale)
4)Un ceppo con plasmide(dotato d inserto del gene 0412 con segnale)

Da qui come continuo per effettuare la corsa elettroforetica?

Luis 22
Utente

Baricalcio

Cittā: Bari


755 Messaggi

Inserito il - 18 marzo 2015 : 00:04:34  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Luis 22  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Luis 22  Invia a Luis 22 un messaggio Yahoo! Invia a Luis 22 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non ho ben capito la domanda...
In sintesi, tu hai ceppi batterici trasformati con plasmidi contenenti il gene che codifica la tua proteina di interesse.
Per arrivare al western blot, devi fare una estrazione proteica, correrla su gel, trasferirla su membrana e utilizzare un anticorpo diretto contro la tua proteina.
Se avrai il segnale, la proteina č stata effettivamente espressa.



La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine č vivere, sfogliarli a caso č sognare. (Arthur Schopenhauer)&
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