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biotekkina
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: nola
12 Messaggi |
 Inserito il - 22 ottobre 2004 : 17:12:16
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buondì a tutti...
volevo sapere se qualcuno sa dirmi perchè, dopo aver lisato le cellule e prima di effettuare il saggio cat si effettua un saggio biorad? grazie1000
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biotekky!! |
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biotech
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
170 Messaggi |
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biotekkina
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: nola
12 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2004 : 14:38:25
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cosa sono i saggi? cat è x verificare la presenza della prot cat , il saggio biorad è x vedere la concentrazione delle proteine e sfrutta la legge di lambert-beer(assorbanza è proporz alla concentrazione).
transfetto un plasmide contenete un gene che codifica cat diretto da un promotore tesssuto specifico, poi liso le cellule e faccio questo saggio biorad x calcolare la concentrazione proteica e poi faccio il saggio cat x vedere cat dove è espressa e di conseguenza vado a vedere il funzionamento del mio promotore clonato a monte, cat in pratica è un reporter. |
biotekky!! |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 23 ottobre 2004 : 20:28:31
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hmmm... non credo che biorad sia l'esatto nome del saggio, probabilmente è un saggio di dosaggio proteico della Biorad (l'azienda che lo produce).
Quando estrai le proteine dalle cellule devi sapere quante ce ne sono, altrimenti il saggio cat o cmq qualsiasi altro dosaggio proteico non avrebbe senso.
Se ad es. ti dico che in un campione ci sono 10 ng di cat e in un altro 20 questo non ti dice assolutamente che nel secondo l'espressione di cat è aumentata.
Se invece dico che ci sono 10 ng su 300 ng di proteine totali nel primo, e 20ng su 280 nel secondo allora la cosa ha molto più senso, perchè ti rapporti al contenuto totale.
Quindi avrò 10/300=3.3% e 20/280=7.1%, cioè un po' più del doppio nel secondo rispetto al primo.
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biotekkina
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: nola
12 Messaggi |
Inserito il - 24 ottobre 2004 : 18:33:41
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grazie mille, sei stato kiarissimo, il nome del saggio in realtà è bradford!!!
grazie mille!!! |
biotekky!! |
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Discussione |
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saggio cat
Didattica e Relazioni
Inserito il - 23 ottobre 2004 : 12:34:17
