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samuash
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2015 : 11:56:10  Mostra Profilo Invia a samuash un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi,
non riesco a capire perchč contando le cellule ne conto sempre molto, molto meno di quanto ce ne siano in effetti in coltura. Quale potrebbero essere i problemi? questo mi crea problemi con la programmazione degli esperimenti perchč magari splitto sapendo di aver piastrato 300 mila cellule e invece dopo due giorni sono giā a confluenza. Daltrocanto spesso anche visivamente la conta non č coerente con il pellet o con il numero di cellule osservate al microscopio prima di staccarle.

Conto in camera di Burker con trypan 1:1

la formula che applico č

num. di cellule tot./3 (quadranti) X 2 (fatt. diluizione) X 10.000

Grazie dell'aiuto

chick80
Moderatore

DNA

Cittā: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2015 : 16:49:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Prima di mettere le cellule nella camera di Burker assicurati di mischiare bene la soluzione (es. pipettando un po' di volte). Le cellule precipitano velocemente verso il fondo e quindi rischi di sottostimare la conta.

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