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Autore Discussione  

luigi8080
Nuovo Arrivato

Città: viterbo


2 Messaggi

Inserito il - 15 marzo 2007 : 12:43:53  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di luigi8080 Invia a luigi8080 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sto usando per la prima volta l'AccuTaq. Mi servirebbe qualche consiglio sui parametri fondamentali da tener conto per amplificare pezzi di 30 e 40 Kb su DNA di piante. Ottengo dei buoni risultati sul controllo lambda ma non ho alcuna amplificazione sul genomico. Mi è stato consigliato di utilizzare dei primers molto lunghi con temperature di melting intorno ai 68° di melting, ma non è venuto niente. E' forse un problema di purificazione del templato o cosa altro? Grazie in anticipo della disponibilità.

dottorato di ricerca

Anyra
Utente Junior

Anyra

Prov.: Pesaro-Urbino
Città: Saltara


212 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2007 : 10:56:33  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Anyra Invia a Anyra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
prova ad aumentare il tempo di denaturazione all'interno del ciclo e abbassa di qualche punto la ta.
Se non ricordo male l'acutaq può migliorare le sue prestazione con il DMSO.
se invece già lo usi prova a fare una provetta senza.
Ciao

Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw
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