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 realt time pcr: strane curve
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agrilaura87
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Inserito il - 28 luglio 2015 : 18:15:05  Mostra Profilo Invia a agrilaura87 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao ragazzi,
sto iniziando a fare real time per quantificare fitoplasmi in arabidopsis. faccio reazioni da 15 ul con eva green come polimerasi. spesso, in maniera del tutto aleatoria, ottengo curve come quelle in figura: la reazione parte troppo presto, poi si stoppa e poi riprende dopo. non dipende dai campioni, ne dai primer: ogni tanto succede, ogni tanto no, anche all'interno del gruppo delle tre repliche. le reazioni in cui la curva è buona sono perfette, con una deviazione bassissima tra le ripetizioni.
a che cosa può essere dovuto questo problema?come risolverlo?
grazie dell'aiuto
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