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sidF
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1 Messaggi

Inserito il - 19 maggio 2016 : 20:15:53  Mostra Profilo Invia a sidF un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Avrei bisogno del vostro aiuto:effettuo un saggio ELISA INDIRETTO per la valutazione del titolo di un Ab diretto contro uno specifico Ag. Utilizzo 5 diverse diluizioni dell' Ab primario (1:250,1:500,1:1000,1:2000,1:4000),per la diluizione 1:250 ottengo un valore di assorbanza di 0,349.Per la diluizione 1:500 ottengo un valore di assorbanza 0,273.Per quella 1:1000 ottengo un valore di assorbanza 0,206, per quella 1:2000ottengo un valore di assorbanza pari a 0,181; per quella 1:4000 ottengo un valore di asorbanza pari a 0,148.Sapendo che il titolo dell' Ab corrisponde alla diluizione alla quale si ha un valore di assorbanza pari al doppio o al triplo del valore corrispondente al controllo negativo vi pongo il mio quesito:utilizzo 3 controlli negativi :Cn.1 AgNO-ab'Si-ab''si ,cN.2:Agsi -Ab'no-Ab''si,cn3 :Ag Si-Ab' Si -Ab'' No.Perchè uso tre controlli negativi ?Perchè per la valutazione del titolo non posso effettuare la media dei valori di assorbanza relativi a tutti i controlli (cn1:0,059;cn2:0,066;cn3:0,067).In uno di questi controlli c'è solo diluente?Datemi una mano!!!!!

madpaolo
Nuovo Arrivato



5 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2016 : 19:30:15  Mostra Profilo Invia a madpaolo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
mica ho capito bene!!!
intanto non sei davanti ad una reazione lineare per cui le differenti letture dei controlli negativi sono alquanto allineate e la media non costituisce una grande errore
dato poi che hai un cut-off di almeno 0.150 significa che solo la diluizione 1:4000 ti può dare un risultato dubbio
ma tu devi valutare un dosaggio qualitativo (presente/assente) o anche quantitativo?
in questo caso non ha comunque molto senso arrivare a diluizioni così alte...o nel tuo caso lo è?
un movimeno anticorpale include così tante variabili che devi avera una linea di massima non la massima linea
ma che tipo di dosaggio stai cercando di organizzare?
saluti
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