Forum

Nome Utente:
Password:
Riconoscimi automaticamente
 Tutti i Forum
 Laboratorio
 Biotecnologie
 Orientamento frammento all'interno del vettore
 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
I seguenti utenti stanno leggendo questo Forum Qui c'è:

Aggiungi Tag Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore Discussione  

Clacla
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 30 aprile 2018 : 08:49:49  Mostra Profilo Invia a Clacla un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve ragazzi, qualcuno potrebbe spiegarmi nel modo più semplice possibile come si faccia a capire l'orientamento del frammento che abbiamo inserito all'interno di un vettore?

Grazie in anticipo!SALUTI!

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi

Inserito il - 30 aprile 2018 : 20:40:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Un modo è la digestione diagnostica. Immagina il seguente frammento nel vettore, con un enzima che NON si trova al centro del frammento:

Vettore ---Enz1---|---250bp---Enz2-------750bp--------|---Vettore


Immagina ora di tagliare con Enz1 e Enz2, se il frammento è quello indicanto nel disegno ottieni un frammento di 250bp, se invece è capovolto ottienti un frammento di 750bp.

Spero sia chiaro.


P.S. non scrivere tutto maiuscolo, equivale ad urlare.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
Torna all'inizio della Pagina

Clacla
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 01 maggio 2018 : 08:42:46  Mostra Profilo Invia a Clacla un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie mille, vorrei capire un po' meglio ed essere sicura di avere chiara la situazione...
Quindi per sapere come è orientato un frammento all'interno di un vettore dovrò utilizzare due enzimi, uno che taglia in un sito di restrizione e l'altro che taglierà in un altro sito di restrizione e uno dei due enzimi taglierà in maniera asimmetrica, in modo tale che:
- il primo enzima che taglierà in maniera simmetrica rilascerà frammento + vettore
il secondo enzima che taglierà in maniera asimmetrica rilascerà il vettore + 2 frammenti che saranno l'inserto?
in questo modo posso capire se il frammento è clonato in un senso o nell'altro?
Grazie ancora!
Torna all'inizio della Pagina

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi

Inserito il - 01 maggio 2018 : 16:16:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
- il primo enzima che taglierà in maniera simmetrica rilascerà frammento + vettore
il secondo enzima che taglierà in maniera asimmetrica rilascerà il vettore + 2 frammenti che saranno l'inserto?
in questo modo posso capire se il frammento è clonato in un senso o nell'altro?

Mmm...Non sono sicuro di aver capito quello che vuoi dire.
Devi fare due tagli (non importa quanti enzimi usi 1, 2...10), uno sul vettore, piu' o meno vicino al sito di clonaggio. L'altro sul frammento (non al centro).
Calcola la lunghezza del frammento che ti esce a seconda che il l'inserto sia in una posizione o l'altra.
Prendi carta e penna, e disegna...ti aiutera'.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
Torna all'inizio della Pagina
  Discussione  

Quanto è utile/interessante questa discussione:

 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
Vai a:
MolecularLab.it © 2003-18 MolecularLab.it Torna all'inizio della Pagina