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Tetra
Nuovo Arrivato


Città: Milano


25 Messaggi
Inserito il - 16 aprile 2007 : 17:57:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Tetra  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Tetra Invia a Tetra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti, qualcuno mi sa spiegare la differenza tra trasfezione transiente e stabile? (riferita a un frammento di cDNA)
I always feel the deepest gloom when day most brightly shines

domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 16 aprile 2007 : 19:08:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Quando trasfetti delle cellule inserisci del Dna "estraneo" nella cellula. Questo Dna però non si integra nel genoma (rimane in una forma episomale) per cui, con le divisioni cellulari si perde, e la cellula non produce più quella proteina: questa è una trasfezione transiente.
Una piccola percentuale di cellule (circa il 2% mi pare) integra questo Dna "estraneo" all'interno del genoma, in una posizione casuale. Questa cellula esprimerà in modo continuo la tua proteina: questa è una trasfezione stabile.
Con un procedimento di selezione puoi selezionarti un singolo clone stabile (che quindi esprime stabilmente la proteina) e usarlo per esperimenti.
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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Tetra
Nuovo Arrivato


Città: Milano


25 Messaggi
Inserito il - 16 aprile 2007 : 20:26:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Tetra  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Tetra Invia a Tetra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie per la risposta! Ma scusa se sono tarda... nella trasfezione transiente il DNA estraneo quindi non viene neanche trascritto in RNA?
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi
Inserito il - 16 aprile 2007 : 22:23:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
No, il DNA viene comunque trascritto, ma il frammento viene perso dopo poche generazioni.
Sei un nuovo arrivato?
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Tetra
Nuovo Arrivato


Città: Milano


25 Messaggi
Inserito il - 16 aprile 2007 : 23:20:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Tetra  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Tetra Invia a Tetra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusate se vi tormento, oltre a poter essere trascritto viene anche tradotto qualche volta?
Qualcuno sa fornirmi un link dove si parla dettagliatamente dell'elettoblotting?
p.s. grazie mille per la risposta sulle sonde radioattive, mi e' stata utilissima all'esame
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domi84
Moderatore

Smile3D

Città: Glasgow


1724 Messaggi
Inserito il - 17 aprile 2007 : 12:17:13  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di domi84 Invia a domi84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Tetra

Scusate se vi tormento, oltre a poter essere trascritto viene anche tradotto qualche volta?

Non qualche volta, ma potremmo dire sempre. Se dal Dna che tu inserisci si forma un mRna, questo poi viene anche tradotto.
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...
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Tetra
Nuovo Arrivato


Città: Milano


25 Messaggi
Inserito il - 17 aprile 2007 : 13:37:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Tetra  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Tetra Invia a Tetra un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie! Se vi mancano le mie domande ditemelo che ritorno alla carica eh!
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ciottolina
Nuovo Arrivato

Prov.: Varese
Città: varese


35 Messaggi
Inserito il - 20 aprile 2007 : 18:51:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ciottolina Invia a ciottolina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
volevo ricordarti che anche il dna che viene mantenuto nella forma episomale può essere mantenuto all'interno della cellula nei vari cicli di replicazione e quindi in questo modo poter avere l'espressione in modo continuo nella nostra proteina.questo viene ottenuto semplicemente mettendo all'interno del ettore che utilizziamo un operone che sia comptibile con la cellula che decidiamo di scegliere come celula ospite per il nostro esperimento.
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