Cellule U2OS. Consigli per la crescita?

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Introduzione alla bioinformatica
Autori Vari

Scienza e ricerca: conquiste e dilemmi. L'importanza della divulgazione scientifica
Ugo Apollonio

Darwin
Jonathan Howard

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

Laboratorio

Biotecnologie

Cellule U2OS. Consigli per la crescita?

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biotecnologie:

Siti Scientifici

Protocolli Laboratorio

Glossario

Didattica e Principi

Multimedia

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

Weathertie
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 20 settembre 2019 : 11:36:56

Salve a tutti!
Da qualche giorno sto cercando di far crescere cellule U2OS ma con risultati scarissimi. Quelle che ho piastrato ieri oggi sono cresciute pochissimo e, anzi, paiono essere meno.
Il terreno � fatto con DMEM, sodio piruvato, glutammato, FBS e pen/strept. Online ho trovato solo qualche variazione del tema, pi� la regolazione della CO2. Voi avete consigli?
Inoltre, per staccare le U2OS dalla petri basta un'azione meccanica come con le HEK oppure bisogna usare tripsina?
Grazie mille

sofychan
Nuovo Arrivato

101 Messaggi

Inserito il - 20 settembre 2019 : 13:45:40

Questa linea cellulare non mi � molto familiare, ma ATCC consiglia di usare McCoy's 5a medium. Hai la possibilit� di provarlo? O di confrontarlo con DMEM per vedere cosa potresti aggiungere? (in genere DMEM va bene per iniziare, con i dovuti accorgimenti)
ATCC dice anche che sono aderenti -> tripsinizzare per i passaggi. Tra l'altro anche le HEK sono aderenti mi pare, no? In ogni caso controlla bene il produttore della tua linea cellulare cosa consiglia per passare le cellule. Rimuovere le cellule per azione meccanica invece che per via enzimatica puo' in certi casi danneggiare le cellule.
Alcune linee cellulari ci mettono un po' a riprendersi dopo averle scongelate e crescono lentamente, se non sei sicura mettile in una T25, cambia il medium ogni 2-3 giorni e aspetta almeno una settimana.
Se hai la possibilit� controlla se la vial che hai scongelato era contaminata da micoplasma.
Se le cellule sono particolarmente sensibili al pH (magari cerca un po' online) puoi eventualmente considerare di aggiungere un po' di HEPES per aumentare la buffering capacity, o altrimenti variare la quantit� di bicarbonato o percentuale di CO2.