ciao, siamo due biologhe con un problema: stiamo per fare un trattamento alle nostre cellule mesangiali ma le sostanze da utilizzare si alterano con il siero contenuto nel mezzo. Come possiamo procedere? Portate le cellule a confluenza con il siero vorremmo poi toglierlo e fare i trattamenti; sopravviveranno? grazie, laura e daniela
La risposta è sì, sopravviveranno! Di solito si fa lo "starving" overnight, cioè si cambia il medium la sera prima dell'esperimento senza metterci siero. Questa è sempre una buona pratica da seguire, in quanto non sai esattamente cosa ci sia nel siero, e il tuo esperimento potrebbe essere falsato dalla sua presenza.
grazie mille..., pensi che sia affidabile il dosaggio delle attività ed espressione degli enzimi stress ossidativo senza conoscere la composizione del mezzo? Potrebbero esserci degli antiossidanti?
Sicuramente il siero contiene antiossidanti, i medium in generale no. Se vai sul sito della casa produttrice del medium ti danno la composizione esatta dei medium e una composizione abbastanza esatta del siero.