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Piastrare le cellule

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scient
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Inserito il - 14 novembre 2023 : 09:21:58

Dobbiamo piastrare le cellule per la trasfezione.
Intendiamo piastrare le cellule in 3 piastre da 6 cm (~25cm^2 ) e 3 piastre da 10 cm
(~60cm2
) alla densita' di 75000 cellule/cm2
usando un volume di coltura di 4ml per le
piastre da 6 cm e di 10 ml per le piastre da 10 cm.
Abbiamo una sospensione cellulare di partenza di 1750000 cellule/ml.
Le cellule andranno piastrate in terreno al 5% siero.
Abbiamo a disposizione:
#8722; terreno + 10% siero
#8722; terreno 0% siero

a) Quanto terreno al 5% siero occorre?
b) Quante cellule servono per l'esperimento?
c) Quale volume della sospensione cellulare di partenza serve per una piastra da 6
cm, per una piastra da 10 cm e in totale?
a) 10*VI= 5*12 Vi= 6 ml
10* Vi= 5* 30 ml Vi= 15 ml
21 ml
b)19.125.000
c) 1.750.000: 1ml= 1.875.000: xml
x=1.07
1.750.000:1ml= 4.500.000: xml
Xml= 2.57
E' Corretto?
Se ho una sospensione iniziale in tot ml, instauro la proporzione per ottenere ml da prelevare per ottenere il numero di cell da piastrare per piastra da 6cm e 10 cm? E' Questa la procedura? HELP ME