Forum

Nome Utente:
Password:
Riconoscimi automaticamente
 Tutti i Forum
 Laboratorio
 Tecniche
 lettura spettrofotometro
 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
I seguenti utenti stanno leggendo questo Forum Qui c'è:

Aggiungi Tag Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore Discussione  

Dani
Nuovo Arrivato

Prov.: L'Aquila
Città: L'Aquila


8 Messaggi

Inserito il - 18 maggio 2007 : 15:39:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dani Invia a Dani un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti sono Daniele dall'Aquila. Vorrei sapere se è possibile che in una lettura allo spettrofotometro dell'RNA, l'assorbanza possa assumere dei valori negativi.Grazie

Daniele

fpotpot
Utente

Città: middleofnowhere


1056 Messaggi

Inserito il - 18 maggio 2007 : 16:02:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di fpotpot Invia a fpotpot un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ma l'assorbanza e' in funzione della concentrazione no?in teoria se e' negativo vuol dire che c'e'meno materiale che assorbe rispetto allo zero del bianco?a me sembra strano...a meno che il bianco non sia contaminato,ho detto una cavolata?
Torna all'inizio della Pagina

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8398 Messaggi

Inserito il - 18 maggio 2007 : 16:45:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao Daniele e benvenuto sul forum!

L'assorbanza non dovrebbe assumere valori negativi quando leggi un campione, al massimo puoi avere "zero" se nel tuo campione non c'è in realtà niente (l'assorbanza è ugale al bianco).
Però il problema potrebbe essere nella soluzione che usi per la lettura o nelle cuvette.

La soluzione di lettura potrebbe essere inquinata, ma in questo caso dovrebbe essere contaminata solo quella che hai usato per il bianco (come dice fpotpot), questo è un po' difficile.

La cosa più probabile è che sia un problema con le cuvette: la cuvetta che hai utilizzato per il bianco non è pulita bene oppure se usi due cuvette che ci sia una differenza di lettura tra le due, a me capita questo utilizzando delle apposite cuvette di plastica, ho notato che tra una e l'altra c'è una differenza (anche se minima) di lettura, ma questo è un problema se hai quantità molto basse, in questo caso a me è capitato di avere assorbanze negative.
Puoi risolvere utilizzando la stessa cuvetta per il bianco e il campione: prima misuri il bianco e poi alla stessa cuvetta aggiungi il campione e leggi la concentrazione.

Ciao
Torna all'inizio della Pagina

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Città: Pisa


615 Messaggi

Inserito il - 18 maggio 2007 : 18:26:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Gabriele Invia a Gabriele un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Oppure hai uno spettrofotometro schifoso come il mio,dove non solo il bianco va sottozero ma l'assorbanza diventa dipendente dal volume del campione testato!!

"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe."
Torna all'inizio della Pagina

Cangrande
Utente Junior

Cangrande Della Scala

Prov.: Verona


280 Messaggi

Inserito il - 19 maggio 2007 : 14:42:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Cangrande Invia a Cangrande un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
In effetti gli spettrofotometri vecchi hanno il problema che se rimani sotto un certo volume il raggio non riesce a leggerli....

Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala.
Torna all'inizio della Pagina

Dani
Nuovo Arrivato

Prov.: L'Aquila
Città: L'Aquila


8 Messaggi

Inserito il - 20 maggio 2007 : 18:09:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dani Invia a Dani un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie ragazzi. Vi farò sapere!

Daniele
Torna all'inizio della Pagina

samu
Nuovo Arrivato




21 Messaggi

Inserito il - 21 maggio 2007 : 11:06:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di samu Invia a samu un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
anche a me sono capitati valori negativi quando praticamente non avevo estratto nulla....
quindi credo sia sicuramente indice di una resa insufficiente per la diluizione che tu hai usato per la quantificazione..prova diluendo meno il campione...
ciaoo
Torna all'inizio della Pagina

Bernardi
Nuovo Arrivato

Prov.: Siena
Città: Siena


14 Messaggi

Inserito il - 21 maggio 2007 : 12:29:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Bernardi Invia a Bernardi un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A me invece è capitata una cosa simile, con uno strumento nuovissimo utilizzato anche per le cinetiche di reazione (immaginate) e utilizzando cuvette al quarzo dedicate. Questo strumento non solo mi leggeva un valore negativo di RNA ma anche di proteine, con il risultato che applicando le sue formuline su i miei valori venivano concentrazioni di RNA positive, concentrazioni rivelatesi veritiere in PCR semiquantitativa e quantitativa. Non so che dirti forse dovresti utilizzare formule più specifiche ai tuoi valori di assorbanza, vedo di inviarti quelle di cui ti ho parlato.
Ciao
Torna all'inizio della Pagina

cin
Utente Junior

ptero

Prov.: Padova
Città: Padova


558 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2007 : 13:31:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cin Invia a cin un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Passate al nano drop.....è tutta n'atra storia!
Torna all'inizio della Pagina

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Città: Pisa


615 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2007 : 15:20:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Gabriele Invia a Gabriele un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Il nanodrop è una figata,però......me lo compri tu?

"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe."
Torna all'inizio della Pagina

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 22 maggio 2007 : 21:41:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
beh... chi più spende meno spende (eheh, facile a dirsi quando i $$$ non son tuoi )

Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui

My photo portfolio (now on G+!)
Torna all'inizio della Pagina

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Città: Pisa


615 Messaggi

Inserito il - 23 maggio 2007 : 01:39:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Gabriele Invia a Gabriele un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
naaaaa,meglio andare al CNR a usare il loro aggratis

"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe."
Torna all'inizio della Pagina
  Discussione  

Quanto è utile/interessante questa discussione:

 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
Vai a:
MolecularLab.it © 2003-18 MolecularLab.it Torna all'inizio della Pagina