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Autore

Discussione

Gst
Utente Junior

Prov.: Roma
Citt�: Ariccia

143 Messaggi

Inserito il - 20 maggio 2007 : 11:53:12

Giorno ragazzi!

Mi servirebbero informazioni sul ceppo DH5alfa di E. coli: perch� viene usato (vantaggi), se e some � stato ingegnerizzato...e altro se c'� altro da sapere

Spero possiate aiutarmi...
Grazie in ogni caso!

Ascoltami con gli occhi...

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 21 maggio 2007 : 01:20:34

Ciao!

Il ceppo di E. coli DH5#945; viene generalmente usato per propagare i plasmidi, il genotipo � questo:

... con alcune variazioni...

contiene mutazioni in alcuni geni, tra le pi� importanti:

end A1: una mutazione che inattiva la endonucleasi I che potrebbe copurificare con il DNA plasmidico durante l�estrazione e degradarlo, questa mutazione consente di ottenere DNA plasmidico di buona qualit�.
recA1: mutazione che inattiva la ricombinasi che � responsabile della ricombinazione tra plasmide e genoma di Coli, questo rende il plasmide pi� stabile.
hsdR17 (rK �, mK +): mutazione che inattiva l�attivit� endonucleasica dell�enzima EcoK I, ma non l�attivit� metilasica. In questo modo il DNA plasmidico non viene degradato ma viene metilato (questo � utile se si vuole trasferire il plasmide in ceppo che ha sia attivit� endonucleasica che metilasica)
lacZ(del)M15: questa mutazione causa una delezione di una porzione della beta-galattosidasi (frammento alfa). Se si inserisce un plasmide contenete questo frammento si ha complementazione e si pu� formare la beta-galattosidasi attiva, quindi crescendo Coli su un terreno contenete X-gal la colonia diventa blu.
Questo � utile per la selezione delle colonie bianche/Blu.

Qui trovi un elenco di "E. Coli strains" con informazioni sulle varie mutazioni.