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Autore

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teresa79
Nuovo Arrivato

Citt�: napoli

1 Messaggi

Inserito il - 31 gennaio 2005 : 15:19:16

salve a tutti. mi servirebbe il protocollo per la crescita di colture primarie di mammella (non so se variano in bese alla tipologia), non � che qualcuno di voi ce l'ha o sa dove posso trovarlo? Grazie mille.

atreliu
Amministratore

Prov.: Milano
Citt�: Milano

2484 Messaggi

Inserito il - 02 febbraio 2005 : 12:22:52

Prova a dare una occhiata qui:
http://www.protocol-online.org/prot/Cell_Biology/Cell_Culture/Primary_Culture/index.html

E troverai ogni risposta ai tuoi perch�...

Riky

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tatiana
Nuovo Arrivato

Prov.: trieste
Citt�: trieste

2 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2005 : 15:18:46

ho un problema:come si evita la banda dei DIMERI di PRIMERS???
perch� mi crea problemi nel sequenziamento successivo.
grazie!!!!buona giornata
taty

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2005 : 20:13:16

Hai 2 modi per evitare i dimeri dei primer:

1) Il metodo migliore � cambiare primers. Dei primer costruiti bene non devono dare dimeri, perch� i dimeri entrano competono con il templato e quindi diminuiscono la resa della PCR.
2) Semplicemente facendo correre un po' di + il gel in modo da separare bene i dimeri dalla banda di interesse e poter quindi tagliare solo quella.

Io cmq, ti consiglierei la prima soluzione.

Ciao!
nICO

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