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ilaria84
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
 Inserito il - 17 luglio 2007 : 11:56:42
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ciao a tutti....
vorei sapere in che cosa differisce il test elisa competitivo da quello non competitivo....
grazie!!
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Verina
Utente Junior
Città: Milano
285 Messaggi |
Inserito il - 17 luglio 2007 : 12:04:53
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Il test ELISA NON COMPETITIVO è un test qualitativo e semi-quantitativo: non fornisce un valore effettivo ma afferma la presenza o l'assenza dell'analita. Il test ELISA COMPETITIVO è un test quali-quantitativo: fornisce un valore specifico con una deviazione standard
http://it.wikipedia.org/wiki/ELISA |
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ilaria84
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 17 luglio 2007 : 12:12:02
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ok....
ma a livello operativo in che cosa differisce?.... |
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paolo865
Utente Junior
Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco
262 Messaggi |
Inserito il - 18 luglio 2007 : 19:20:23
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ES. Di test competitivo Elisa
Voglio valutare la concentrazione di IL-2 prodotta dala mia cultura di Linfociti T per es. Possiedo una piastra a 96 pozzetti a cui ho legato un anticorpo diretto contro l'IL-2 e una concentrazione nota di interleuchina 2 marcata. Dopo essermi costruito una retta di taratura con diverse concentrazioni del mio antigene noto marcato ora mischio una quantità nota di antigene marcato con parte della mia soluzione del terreno in cui ho fatto crescere i linfociti T in cui vi sarà una concentrazione non nota di interleuchina 2. L'IL-2 del terreno di coltura competerà con l'IL-2 marcata nel legarsi all'anticorpo specifico, dunque MAGGIORE SARà IL CALO DI ASSORBANZA(COLORE EMESSO DALL'IL-2 MARCATA)e MAGGIORE SARà LA CONCENTRAZIONE DI IL2 DEL MIO TERRENO DI COLTURA CHE SI è "CONTESA" IL LEGAME CON L'ANTICORPO. |
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paolo865
Utente Junior
Prov.: Como
Città: Olgiate Comasco
262 Messaggi |
Inserito il - 18 luglio 2007 : 19:26:13
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nel non competitivo o A SANDWICH invece dovremmo usare una piastra a cui è legato un anticorpo anti IL-2 e un anticorpo secondario che interagisce con un altro epitopo dell'IL-2 MARCATO. Si costruisce prima una retta di taratura con diverse concentrazioni di antigene noto.dopodichè si testa la concentrazione di IL-2 a concentrazione sconosciuta nel terreno di coltura come fatto per costruire la retta di taratura e quindi si aggiunge l'anticorpo secondario marcato e si lava per eliminare l'anticorpo in eccesso non legato. IN TAL CASO MAGGIORE è IL COLORE OVVERO L'ASSORBANZA REGISTRATA, MAGGIORE è LA CONCENTRAZIONE DI IL-2 NEL TERRENO DI COLTURA.
SPERO DI ESSERE STATO CHIARO |
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ilaria84
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 19 luglio 2007 : 09:46:59
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grazie mille!!
sei stato molto chiaro!! |
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
Inserito il - 20 luglio 2007 : 14:22:42
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Per la ricerca di anticorpi, esiste anche l'ELISA per competizione , che fa avvenire la reazione mettendo in competizione due anticorpi, uno marcato e l'altro ricercato.
in pratica sul pozzetto della microtiter, è adeso l'antigene su cui si aggiunge il siero incognito, dopo un’incubazione più o meno breve,si lava la piastra e si aggiunge l'anticorpo specifico marcato (coniugato); ora se dopo incubazione e lavaggio, il coniugato resta adeso, vuol dire che ha trovato i siti liberi ed ha potuto formare l'immunocomplesso. Viceversa se va via con il lavaggio, vuol significare che ha trovato i siti occupati dall'anticorpo specifico presente nel siero. Per cui, andando a rilevare l'assorbanza, il negativo si colora e il positivo resta più o meno incolore. 
PS. può servire, non si sa mai
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zio |
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ilaria84
Nuovo Arrivato
9 Messaggi |
Inserito il - 20 luglio 2007 : 15:13:43
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grazie!!
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zio
Utente Junior
Città: Napoli (IRAQ)
120 Messaggi |
Inserito il - 22 luglio 2007 : 19:17:17
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ho trovato un'altra spiegazione del metodo (classico) di C-ELISA
ELISA COMPETIZIONE:
Questo sistema è molto utilizzato per il rilevamento di anticorpi specifici. Si parte da un anticorpo (monoclonale o policlonale), verso un antigene conosciuto, che previamente è stato immobilizzato nella piastra. Viene chiamato di competizione perché il siero campione è incubato previamente con l'antigene, prima di incubarlo con l'antisiero fissato nella piastra, e quindi è in competizione con quest'ultimo.
I passi successivi sono l'aggiunta e l'incubazione col coniugato, lavaggio, aggiunta finale del substrato e lettura,il negativo si colora e il positivo resta più o meno incolore .
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zio |
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