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valeriamassa
Nuovo Arrivato


Prov.: Milano
CittÓ: milano


64 Messaggi

Inserito il - 23 luglio 2007 : 14:16:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di valeriamassa  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di valeriamassa Invia a valeriamassa un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Devo clonare il mio gene in un vettore virale: ho inserito negli oligo i siti di restrizione per due diversi enzimi, per˛ un enzima crea estremitÓ piatte e l'altro estremitÓ coesive,qualcuno sa dirmi se avr˛ problemi al momento della ligazione??

valeria

Aureus
Utente Junior

0613_da_Fil23

Prov.: Forlý-Cesena
CittÓ: Gambettola


123 Messaggi

Inserito il - 23 luglio 2007 : 15:47:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Aureus  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Aureus Invia a Aureus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao,

la specificitÓ aumenta con le estremitÓ "stiky" di due enzimi che magari tagliano in modo diverso...
...comunque ci sono ligazioni pi¨ difficili di quella che hai scelto tu..
... il mio consiglio Ŕ quello di provare!

http://didattica.cribi.unipd.it/ingegenet/06Lucidi4x.pdf

www.tlbspazio.it

Tecnici di Laboratorio Biomedico
Lorenzo Nardi
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LUCIA14976
Nuovo Arrivato



20 Messaggi

Inserito il - 23 luglio 2007 : 20:51:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di LUCIA14976 Invia a LUCIA14976 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non credo che darÓ particolari problemi basta digerire il vettore con gli stessi enzimi. i clonaggi blunt sono un po' pi¨ delicati e richiedono pi¨ tempo, quindi io per i tempi e per le modalitÓ di ligasi considererei entrambi blunt, ciao
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mikimix
Nuovo Arrivato

Prov.: Matera
CittÓ: Marconia


17 Messaggi

Inserito il - 10 agosto 2007 : 10:32:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mikimix Invia a mikimix un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Caio a mio parere anche se non ho una grande esperienza pratica Ŕ molto pi¨ facile che la ligazione avvenga con delle estremitÓ protuting,magari scegli un altro enzima di restrizione,anche se in questo coso una delle due estremitÓ dovrebbe legarsi facilmente riducendo i rischi di ricircolarizazione.
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Cangrande
Utente Junior

Cangrande Della Scala

Prov.: Verona


280 Messaggi

Inserito il - 10 agosto 2007 : 14:39:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Cangrande Invia a Cangrande un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
A livello teorico non dovresti aver problemi. Anch'io ti consiglio di provare.

Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala.
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Utente Junior



565 Messaggi

Inserito il - 11 agosto 2007 : 11:16:45  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lÓ Invia a lÓ un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao! penso che se digerisci il vettore e la parte del DNA da clonare con i medesimi enzimi non dovresti avere probleni con la ligazione. Se no usa altri enzimi che diano entrambi le stesse estremitÓ.
Comunque ripeto non dovresti avere problemi in linea di massima.
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