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Autore

Discussione

cristiano
Nuovo Arrivato

Prov.: Novara
Citt�: novara

37 Messaggi

Inserito il - 26 luglio 2007 : 15:29:53

Ciao a tutti, in questi giorni sto estraendo RNA da frutta, precisamente da nocciola, che per� si trova ancora ad uno stadio molto iniziale di maturazione (a circa un mese e mezzo dalla raccolta). I miei risultati sono pessimi, la qualit� dell'estratto � veramente ridicola (per chi si intende di bioanalyzer ho dei RIN di 2.3-2.4) e questo nonostante io lavori con un kit testato e pluricertificato, in un ambiente strapulito e che i campioni siano stati raccolti ed immediatamente posti a -80�C. Aggiungo anche che ho gi� lavorato sulla stessa matrice con risultati decisamente migliori.
Il mio dubbio � questo, non � che per caso l'RNA della frutta quando � molto acerba � gi� di suo molto frammentato e che le subunit� 28 e 18S non siano ancora riconoscibili? Ad esempio perch� l'attivit� cellulare � ancora molto latente e di conseguenza la trascrizione ancora inefficiente? Vi sembra possibile? Grazie!

CRI

rubio
Nuovo Arrivato

Citt�: Roma

13 Messaggi

Inserito il - 27 luglio 2007 : 11:29:08

Premesso che � da poco che ho iniziato a lavorare con l'RNA quindi ne capisco veramente poco....io ho avuto problemi di estrazione quando la temperatura ambiente del mio laboratorio � diventata "tropicale" (problema riscontrato anche dai ragazzi del laboratorio vicino al mio)...pu� essere successo anche a te?

cristiano
Nuovo Arrivato

Prov.: Novara
Citt�: novara

37 Messaggi

Inserito il - 27 luglio 2007 : 11:36:36

no, quello non credo visto che abbiamo il condizionatore, anche se in effetti gli esperimenti vengono meglio in inverno clima o non clima. In effetti per� questo tipo di estrazione lo faccio sempre in questa stagione perch� � quando mi arrivano i campioni

CRI

Cangrande
Utente Junior

Prov.: Verona

280 Messaggi

Inserito il - 01 agosto 2007 : 18:31:28

Sai per caso la composizione della nocciola acerba? Secondo me c'� qualcosa che interferisce ed il tuo kit � stato messo a punto su frutta "matura".

Magnifico atque victoriosissimo Domino, Domino Kani Grandi de la Scala.

vanessa
Nuovo Arrivato

12 Messaggi

Inserito il - 08 agosto 2007 : 14:12:06

Prova con il Trizol con quello si riesce ad estrarre qualsiasi cosa!
ciao Vanessa
Ps se vuoi ti mando il protocollo