purificazione cDNA

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Autore

Discussione

caralinda79
Nuovo Arrivato

Citt�: firenze

21 Messaggi

Inserito il - 03 settembre 2007 : 15:39:03

Ciao!
ho un cDNA a singolo filamento marcato con digossigenina ottenuto con retrotrascrizione e contemporanea marcatura, poi digestione con RNasi. Come faccio a purificarlo, cio� a eliminare buffer, enzimi, dNTP che non hanno reagito, dUTP-Dig e frammenti di RNA? io sto usando delle colonnine quiagen per purificare le pcr, quindi per DNA a doppio filamento, ma mi viene il dubbio che i singoli filamenti non vengano trattenuti granch�! devo comprare colonnine apposta per i singoli filamenti???
help!

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 04 settembre 2007 : 18:23:30

Credo sia meglio utilizzare delle colonnine (e dei buffer) apposite per la purificazione di sonde. Con quelle per la PCR rischi di perderle, magari una percentuale riesci a trattenerla ma non penso che tu abbia una buona efficienza.