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Autore

Discussione

karme
Nuovo Arrivato

Prov.: Padova
Citt�: padova

2 Messaggi

Inserito il - 07 settembre 2007 : 17:12:15

qualcuno avrebbe il protocollo per l amisurazione del Ca2+ mediante il fura-2am?grazie

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 07 settembre 2007 : 23:09:46

Generalmente per espianti di tessuto li fai incubare in una camera umidificata in:
2.5-3 mM di Fura in 80% DMSO/20% pluronic F-127, diluito 1:200 con ACSF (o medium di coltura, senza siero).

Se usi cellule potresti doverlo diluire di pi� per�.

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alba
Nuovo Arrivato

Prov.: Salerno

1 Messaggi

Inserito il - 20 settembre 2007 : 17:47:56

ciao, di solito io lo uso su cellule e in base al tipo di cellula faccio fare una incubazione di 30 o 60 minuti a temperatura ambiente o a 37�C. uso il fura ad una concentrazione di 6 micromolare e senza pluronic perch� entra facilmente nelle cellule.

alba esposito

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 21 settembre 2007 : 00:29:10

Se usi tessuto per� senza pluronic non so quanta penetrazione hai...

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nicchio
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 27 settembre 2007 : 22:34:20

Io utilizzo il fura su cellule di linea (astrociti o neuroblastoma). uso una concentrazione di 2 uM per 45 minuti a 37 �C poi lavo e rifaccio una incubazione per altri 15 minuti. Uso HBS con acido pluronico. se hai bisogno di un protocollo piu' completo fammi sapere