PCR quantitativa

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

I mille volti della scienza. Cultura scientifica e umanistica nella società
Antonio Fernandez Ranada

Biochimica. Con aspetti molecolari della biologia cellulare
Reginald Garrett, Charles Grisham

Dogma contro critica. Mondi possibili nella storia della scienza
Thomas S. Kuhn

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

Laboratorio

Biologia Molecolare

PCR quantitativa

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biologia Molecolare:

Didattica

Blog Inside the Cell

Protocolli

Siti di Biologia Molecolare e Tecniche

Quiz

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

cri cri
Nuovo Arrivato

Prov.: Bari
Città: bari

6 Messaggi

Inserito il - 20 ottobre 2007 : 18:58:59

Mi date una mano a capire i metodi delle diluizioni scalari, dello standard esterno e dello standard interno nella PCR quantitativa?

Ne sapete qualcosa?
Grazie!

cri cri

Wee184
Nuovo Arrivato

Prov.: Siena
Città: Siena

8 Messaggi

Inserito il - 20 ottobre 2007 : 20:21:20

Le diluizioni scalari o seriali sono necessarie per poter identificare la concentrazione del tuo campione sconosciuto dopo una pcr. Si parte da un campione a concentrazione nota : poniamo per esempio che il tuo campione di partenza abbia una concentrazione di cDNA( calcolata a partire dalla concetrazione di rna con cui hai effettuato la tua RT ponendo un efficienza di reazione del 100%)di 10 ug. Decidi di applicare un fattore di diluizione 100 per ognipassaggio scalare:
10ug
0.10ug
0.001ug
e così via....

di solito bastano 5 o 6 diluizioni. Per verificare se la tua curva standard sia adatta ai tuoi esperimenti effettui dei tentativi caricando insieme ai tuoi campioni sconosciuti anche i punti di curva. Se le diluizioni di curva sono giuste la maggior parte dei tuoi campioni sconosciuti dovrebbe "caderti" in curva....
spero che sia stato chiaro in caso contrario mi dispiace. ciao.

Wee1... oh yes!!
WEE.. WHAT???