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Autore

Discussione

lisetta
Nuovo Arrivato

Prov.: Milano
Citt�: mialno

91 Messaggi

Inserito il - 26 ottobre 2007 : 15:20:02

sulla confezio della tripsina c'� scritto...

Description:
0.5% Trypsin, 5.3 mM EDTA�4Na
Mycoplasma screened. Porcine parvovirus and tested.
with 5.0 g/L Trypsin (1:250), 2.0 g/L of EDTA�4Na and 8.5 g/L of NaCl,
without Phenol Red
Dilution: Aseptically prepare 1X solution in balanced salt solution without Ca2+ and Mg2+.
Final concentration: 0.5 g of Trypsin (1:250) and 0.2 g EDTA�4Na/L.

Storage:
�5�C to �25�C

devo fare qualcosa? perch� io l'ho messa cos� com'� nel terreno contenente tessuto ma nn si � dissociato. Il protocollo dice di metterne lo 0.025% io ho fatto il calcolo essendo concentrata allo 0.5% su 1.5 ml di terreno ne ho messa 200 ul. Per� magari nn dovevo metterla prendendola direttamente dalla sua confezione? in base a ci� ke c'� scritto in alto cosa devo fare a posso usare cos� o devo fare qualke cosa? grazie elisa

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 26 ottobre 2007 : 15:47:57

cosa intendi per "terreno contenente il tessuto"? se c'� il siero non dissocerai mai il tuo tessuto perch� nel siero ci sono inibitori della tripsina. lo sapevi?
infatti quando si tripsinizzano le cellule piastrate devi prima togliere il terreno, lavare con PBS, toglierlo e poi aggiungere la tripsina.

Iside
Utente Attivo

Citt�: Napoli

1375 Messaggi

Inserito il - 26 ottobre 2007 : 20:06:49

Citazione:
Messaggio inserito da darkene

cosa intendi per "terreno contenente il tessuto"? se c'� il siero non dissocerai mai il tuo tessuto perch� nel siero ci sono inibitori della tripsina. lo sapevi?
infatti quando si tripsinizzano le cellule piastrate devi prima togliere il terreno, lavare con PBS, toglierlo e poi aggiungere la tripsina.

quoto

...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...

lisetta
Nuovo Arrivato

Prov.: Milano
Citt�: mialno

91 Messaggi

Inserito il - 29 ottobre 2007 : 08:37:58

no no ma nn c'� siero...il terreno nn contiene siero contiene sl tessuto da cui mediante azione tripsina dissocio e stacco cellule...per usare quella tripsina devo diluirla? il processo cn pbs lo effettuo per cellule ataccate ad una pistra qui invece ho tessuto da cui devo staccarle...per� sulla etichetta della tripsina c'� scritto diluition ecc e volevo chiedrvi cosa devo fare

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 29 ottobre 2007 : 12:17:46

allora non so. non l'ho mai fatto.
io proverei o ad aumentare il tempo d'azione, o a metterne di pi�.