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biomol
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65 Messaggi |
 Inserito il - 30 novembre 2007 : 11:09:48
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ciao. ho un dybbio che spero mi possiate risolvere a volo.quando faccio le letture di rna metto, per esempio, 4 microliti di Rna e aggiungi H2o fino ad 1 ml. come faccio a ricavare la conc del mio rna?io credo che prendo la lettura a 260 e la moltiplico per 40, ho così la conc del mio rna e poi se ho letto 4 microliti quella è la conc in 4 microliti...giusto?aiuto..... 
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jovy
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102 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 11:31:43
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| la lettura e con spettrofotometria uv-visibile? |
gi |
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malaga
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15 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 11:34:51
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Ciao.Io direi che il valore di ASSORBANZA che ottiene dalla spettroscpia di assorbimento ti permette di ottenere la CONCENTRAZIONE del tuo campione di acido nucleico relativa però al volume totale usato nell'analisi.Nel momento in cui aggiungi H2O diluisci quindi modifichi la C del campione (moli o gr per V di soluzione),però la quantità in peso di ac.nucleico è la stessa.
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malax |
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biomol
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65 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 11:38:44
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si certo che la lettura è in uv
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cristiano
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Prov.: Novara
Città: novara
37 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 11:59:25
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| Beh se usi uno spettrofotometro di solito puoi impostare tu la diluizione che usi prima di fargli fare la lettura (in questo caso 4 ul in 1 ml e` una dil. 1:250), oppure se non vuoi o non puoi farlo prima, dividerai il tuo valore finale (espresso in ug, giusto?) per 250 e otterrai la concentrazione ug/ul del tuo campione. |
CRI |
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cristiano
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Prov.: Novara
Città: novara
37 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 12:10:37
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scusa, cazzata: devi MOLTIPLICARE, non dividere, per 250, che e` il fattore di diluizione usato, il valore che ti da` lo strumento e otterrai la conc. ug/ml (e non ul come avevo scritto prima) del tuo campione. Se poi vuoi sapere quanto ne hai in 1 ul dividi semplicemente per 1000.
Scusa eh, ma sono ancora un po' rimbambito da tutti i conti che ho fatto stamattina!!  |
CRI |
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malaga
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15 Messaggi |
Inserito il - 30 novembre 2007 : 12:29:15
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| se la C (microgrammi/ml) ottenuta dall'analisi UV la moltiplichi per il V(ml)utilizzato nell'analisi UV ottieni la quantità in peso del tuo RNA (in microgrammi);dividendo poi i microgrammi di RNA per il volume di soluzione in cui sospendi il campione ottieni (a seconda del V della soluzione) la concentrazione del tuo RNA in soluzione.Comunque è come moltiplicare la C ottenuta per il fattore di diluizione,la stessa cosa detta da cristiano. |
malax |
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