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Autore Discussione  

kornchild
Nuovo Arrivato

Città: roma


2 Messaggi
Inserito il - 13 dicembre 2007 : 22:17:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kornchild Invia a kornchild un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti,
devo estrarre RNA da fettine di tessuto tagliate al criostato (10um di spessore). Potete consigliarmi quali accortezze avere per usare metodo Tryzol? inoltre, un processo di sonicazione può danneggiare l'RNA?

cin
Utente Junior

ptero

Prov.: Padova
Città: Padova


558 Messaggi
Inserito il - 14 dicembre 2007 : 11:58:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cin Invia a cin un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Auguri.....
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cin
Utente Junior

ptero

Prov.: Padova
Città: Padova


558 Messaggi
Inserito il - 14 dicembre 2007 : 12:07:18  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cin Invia a cin un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Dai, scherzavo.
Avendo una quantità così piccola di campione forse ti converrebbe usare le colonnine per l'estrazione. Dopo aver tagliato il pezzo lo processi subito, vero?
Non penso che la sonicazione danneggi l'RNA, ma devi fare in modo che stia a sonicare poco tempo e non so se la temperatura nel sonicatore possa essere mantenuta a +4°C ( se usi la metodica del trizol).
Un metodo molto efficace per biopsie o piccole quantità di tessuto è uno strumento , ora non ricordo il nome ( se ti interessa te lo faccio sapere), che utilizza delle biglie che poni all'interno della tua eppendorf insieme al tuo pezzo, così da frantumarlo e disgregarlo adeguatamente. Noi ci siamo trovati benissimo, bisogna solo fare delle prove per decidere il tempo e il n° di biglie.
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