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Silvy
Nuovo Arrivato
Prov.: Bergamo
Città: Trescore Balneario
26 Messaggi |
 Inserito il - 07 febbraio 2008 : 19:37:55
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Esatto, non sono fosforilati al 5'...Purtroppo ne so qualcosa, nel senso che lo scorso anno, mentre facevo un clonaggio blunt, inizialmente defosforilavo il vettore senza tener conto del fatto che gli oligo per amplificare l'inserto fossero defosforilati al 5'
Il problema di attuare un clonaggio di questo tipo è che durante la ligazione, molti vettori, non essendo defosforilati, si chiuderanno su sè stessi e quindi avrai molte colonie trasformate dal solo vettore senza inserto...
Cmq c'è sempre l'opzione di acquistare oligo fosforilati al 5' (ovviamente costeranno di più)oppure di fosforilare l'inserto ottenuto. |
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