PCR con primer degenerati

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Introduzione alla bioinformatica
Autori Vari

Introduzione alla struttura delle proteine
Carl Branden, John Tooze

Scienza e ricerca: conquiste e dilemmi. L'importanza della divulgazione scientifica
Ugo Apollonio

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

go update ur security

Tecniche

PCR con primer degenerati

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Tecniche di Laboratorio:

Didattica e Relazioni

InsideBlog

Siti Scientifici

Protocolli Laboratorio

Siti Scientifici

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

valia
Moderatore

Prov.: UK

1001 Messaggi

Inserito il - 30 settembre 2005 : 09:39:26

Qualcuno di voi l'ha mai fatta?
Consigli?
Devo farla tutta da sola, e io ho fatto a malapena una PCR normale...
Accetto volentieri QUALSIASI suggerimento!!

(so gia' che e' praticamente impossibile che venga ai primi.. 10 tentativi.. sono preparata all'insuccesso!!)

grazie grazie

AleXo
Moderatore

Prov.: Estero
Citt�: San Francisco, California

1550 Messaggi

Inserito il - 30 settembre 2005 : 23:47:41

Valia sono in una situazione simile per tutt'altro problema! [ke detto cos� potrebbe non significare molto]
ed � solo la prima settimana sigh!
non posso aiutarti ma...solidariet�!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 01 ottobre 2005 : 05:27:28

http://www.protocol-online.org/prot/Molecular_Biology/PCR/Degenerate_PCR/index.html

Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui

My photo portfolio (now on G+!)

valia
Moderatore

Prov.: UK

1001 Messaggi

Inserito il - 02 ottobre 2005 : 13:05:26

Grazie mille.. vi faro' sapere come va...
Alexo, che dire? in bocca al lupo anche a te! Le cose non possono che migliorare dopo la prima settimana, no?

valia
Moderatore

Prov.: UK

1001 Messaggi

Inserito il - 30 dicembre 2005 : 14:42:44

Allora, ho usato i primer degenerati con diversi programmi di PCR, ho provato anche con rampe di temperatura di annealling e/o tempo di estensione. Ho ottenuto una banda piu' o meno dell'altezza voluta, ho clonato e mandato a sequenziare.. ma il frammento era stato amplificato dal solo primer reverse

(in entrambe le direzioni).

Cosi' ho provato una nested PCR usando sempre primer degenerati, purificando la banda dal gel dopo la prima PCR! Ho ottenuto un'altra banda interessante.. questa amplificata da primer F e R

..ma non si tratta del gene che mi interessa

!

Aggiungo che sto usando 5 diversi primer reverse, altrimenti uno solo sarebbe stato troppo degenerato! Cosi' invece quello col numero maggiore di degenerazioni ne ha circa 300.

Avete consigli???

Discussione

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Vai a:

MolecularLab.it

Android e Mobile



Scarica le app! Ora anche sul tuo smartphone!

Ciao Login - Iscriviti



Visitatori: 100

Newsletter
Iscriviti alla newsletter: ogni settimana notizie e fatti dal mondo biotech