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 rflp pcr non confermate!!!
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ottagono
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2 Messaggi

Inserito il - 19 febbraio 2008 : 14:58:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ottagono Invia a ottagono un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Nn riesco a capacitarmi di quello che è successo oggi in laboratorio: ho amplificato e ristretto dei nuovi campioni per un polimorfismo con cui avevo già lavorato anni fa, e per conferma ho inserito un campione già genotipizzato anni fa...risultato:il campione vecchio da wt è diventato etero. A quel punto ho preso un bel pò di campioni vecchi, e i risultati sono spesso diversi...e sto parlando di campioni genotipizzati con la rflp e confermati in doppio anni fa...nn riesco a capire se c'è qualcosa che non va nel presente, o se ho sbagliato tutto nel passato, o se i campioni estrtti conservati a -20 possano aver subito qualche cambiamento!
primers ed enzima sono gli stessi, cosa può essere successo?
aiuto!!!

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Città: Pisa


615 Messaggi

Inserito il - 19 febbraio 2008 : 19:05:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Gabriele Invia a Gabriele un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Benvenuto nel club,ho dei campioni che,fatti 5 volte,hanno oscillato 5 volte tra eterozigote e omozigote mutato. Secondo me è l'enzima di restrizione che è poco efficiente quindi basta poco per far si che non digerisca completamente una banda.

"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe."
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ottagono
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 20 febbraio 2008 : 10:40:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di ottagono Invia a ottagono un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
GRAZIE GABRIELE!Ank'io penso ke l'enzima di restrizione sia poco efficiente, ma la cosa strana è ke i campioni fatti oggi si confermano, ma sono diversi dai risultati passati che abbiamo già confermato. tu sai x caso dopo quanto tempo scadono gli enzimi di restrizione?
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