microsatellite multiplex PCR [Richiesta spiegaz.]

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Autore

Discussione

sbezzo
Nuovo Arrivato

Prov.: Trento
Citt�: trento

3 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 16:12:12

Chi mi puo spiegare come funziona la microsatellite multiplex PCR e i principi su cui si basa??!!?? Vi ringrazio molto......

hurricane86
Nuovo Arrivato

50 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 17:18:10

se non ho capito male ti riferisci ad una tecnica utilizzata in genetica forense.(??)
la PCR multiplex � una PCR che contemporaneamente amplifica pi� loci utilizzando pi� primer contemporaneamente velocizzando di molto i tempi, il rischio che un primer si appai da una parte sbagliata sostanzialmente non c'�, dato che si appaiano per comlementariet� e viene utilizzata una condizione alta di stringenza.
i primer vengono presi complementari alle sequenze che stanno al di fuori del gene che vuoi amlificare. I loci iper variabili dei microstatelliti sono circondati da sequenze molto stabili. il principio della pcr st� nella replicazione (denaturo, appaio primers, polimerizzo su stampo..denaturo appaio....)e quindi nell'aumento del numero di copie del gene, in modo tale che questo possa essere visto tramite blotting.
i micro satelliti sono piccoli blocchi di sequenza altamente ripetuti ed in numero ipervariabile di volte, in genetica forense la usano per determinare i profili ed escudere o dare probabilit� di identificazione dei sospattati nei crimini.

Think I'll lose my mind if I don't find something to pacify

....muore lentamente chi non esplora cio che non conosce....

valia
Moderatore

Prov.: UK

1001 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 17:38:15

Citazione:
Messaggio inserito da hurricane86
...in modo tale che questo possa essere visto tramite blotting.

In realta' le diverse regioni amplificate vengono corse in un gel di agarosio o acrilammide e discriminate in base alla loro lunghezza (questo detto volgarmente, in realta' si usano tecniche automatizzate con elettroforesi capillare).

Guarda qui:
http:/www.molecularlab.it/interactive/tecniche/elettroforesi-simulazione.asp
http://www.molecularlab.it/interactive/tecniche/profiling.asp

Per la Multiplex puoi usare anche la funzione cerca del forum, se n'� gia' parlato:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=2439

sbezzo
Nuovo Arrivato

Prov.: Trento
Citt�: trento

3 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 19:36:25

Molto gentili ed esaustivi!Ancora grazie....Se qualcuno riesce a darmi qualche altra dritta ugualmente interessante � ben accetta

!!!

Topogigio77
Nuovo Arrivato

Citt�: Milano

37 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2008 : 12:34:10

Sbezzo... quanto scritto sopra � corretto ma del tutto generico...a te per cosa potrebbe interessare quella applicazione?