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Autore

Discussione

daisy
Nuovo Arrivato

Prov.: Asti
Citt�: asti

108 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2008 : 15:45:12

ciao a tutti qualcuno di voi sa spiegarmi come si misura il livello di calcio in vivo e in vitro. Effettuo nel primo caso delle misurazioni ogni due secondi , invece nel secondo caso utilizzo delle sostanze fluorescenti (sugli appunti di una mia compagna c'� scritto quick 2-mMv

) ... la prof l'ha spiegato a proposito del ciclo dell'inositolo. c'� qualcuno che mi pu� aiutare?

e@daisy

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2008 : 21:51:48

Si possono usare delle sostanze chiamate "indicatori per il calcio" che semplificando molto sono sostanze che legano il calcio e la cui fluorescenza cambia a seconda che siano legate o meno al calcio.

Esistono due grosse classi di indicatori: gli indicatori chimici che sono piccole molecole derivate dal BAPTA (un chelante per il calcio), ad es. Calcium Green, Fluo-3, Fura-2, Rhod-2 etc
L'altra classe sono i GECI (genetically encodable calcium indicators), che sono proteine derivate della GFP (green fluorescent protein) ingegnerizzate per legare il calcio. Esempi sono le Pericams e le Cameleons. Ottime per misurazioni in vivo (es. se hai un animale transgenico che esprime queste proteine).

In ogni caso fai una foto o misuri con un fluorimetro la fluorescenza del tuo campione ogni x secondi (o ogni quanto vuoi tu) e poi puoi vedere come varia il livello di calcio al passare del tempo

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