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serenella
Nuovo Arrivato

Prov.: Ascoli Piceno
Cittā: Castignano


5 Messaggi

Inserito il - 13 marzo 2008 : 22:51:30  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di serenella Invia a serenella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando

Sono una nuova iscritta, volevo presentarmi, salutare tutti e cogliere l'occasione per chiedere se qualcuno sa come purificare i plasmidi lineari dopo il taglio con gli enzimi di restrizione (per il clonaggio). Un metodo lo conosco, č quello classico del maniatis-sambrook ma speravo in un alternativa.
Grazie in anticipo

darkene
Utente Junior

occhi



291 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2008 : 10:16:08  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di darkene Invia a darkene un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
si usano dei kit commerciali che consentono di eluire il frammento di interesse dal gel di agarosio. si corre la digestione, si taglia la banda di interesse e si usa il kit per estrarre il dna sciogliendo il gel. in particolare ne esistono di due tipi:
uno utilizza delle colonnine cromatografiche da centrifuga (es. NucleoSpin)
l'altro utilizza una resina che lega il dna (es. Quiaex II della Quiagen)
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serenella
Nuovo Arrivato

Prov.: Ascoli Piceno
Cittā: Castignano


5 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2008 : 21:10:13  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di serenella Invia a serenella un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille, hoi trovato un ottimo kit commerciale che purifica da gel frammenti fino a 10Kb e che usa il cristal violetto al posto dell'etidio, in questo modo evito anche danni da UV.
grazie ancora
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