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 Estrazione RNA da tessuti fissati in formaldeide
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gfpmouse
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Inserito il - 28 marzo 2008 : 15:53:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di gfpmouse Invia a gfpmouse un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
[1] ho cercato se c'erano tread simili nel forum, non ne ho trovati di consoni alle mie necessità, quindi ne scrivo uno nuovo. spero comunque che non sia un armomento già discusso (e risolto) altre volte....




Mi trovo a lavorare con campioni di tessuti fissati in formalina 4%, e conservati a RT per 1-2 anni.

Devo estrarci l'RNA... Escludendo l'utilizzo di kit appositi...

Che consigliate?


Al momento ho provato a basarmi su un lavoro di Masuda (et al, 1999), quindi ho disidratato il tessuto in alcool, poi omogenato e digerito con proteasi k prima di estrarre col trizol. (insomma, ho mescolato il protocollo consigliato nell'articolo con quello del mio lab).
Visti i risultati scarsi, mi chiedevo se non c'è qualche metodo più aggiornato e rodato...

O magari qualche accorgimento assolutamente necessario per avere dei risultati decorosi.


Grazie dell'attenzione, e ciao!
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