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 NH4Cl in immunofluorenza
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Sognatrice
Nuovo Arrivato


Prov.: Vicenza
Città: Vicenza


3 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2008 : 18:43:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Sognatrice Invia a Sognatrice un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi!
ho appena iniziato a fare immunofluorescenza su tessuti paraffinati e secondo il protocollo dopo il trattamento con pentola a pressione per denaturare le proteine e poi con tripsina...devo fare un bagno con NH4Cl 50mM, xchè? qual' è la sua funzione?

ciaoo

la_fra
Utente

betty



750 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2008 : 23:20:52  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di la_fra  Rispondi Quotando
serve per bloccare le aldeidi, come si usa l'H2O2 per bloccare le perossidasi endogene

Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire)
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la_fra
Utente

betty



750 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2008 : 23:27:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di la_fra  Rispondi Quotando
suppongo che se si fa il blocco delle perossidasi endogene quando si utilizza un sistema di rivelazione basato su perossidasi (che senza il blocco darebbe colorazioni aspecifiche) nel tuo caso il sistema si basi su aldeidi, o in qualche altro passaggio ci sia comunque interferenza delle aldeidi libere che è preferibile evitare. nello specifico non so

Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire)
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Dionysos
Moderatore

D

Città: Heidelberg


1913 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2008 : 00:52:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dionysos  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Dionysos Invia a Dionysos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Probabilmente fissi con formaldeide, e la blocchi con NH4Cl per evitare che
la formaldeide residua vada a fissare pure gli anticorpi.

Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!


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Sognatrice
Nuovo Arrivato


Prov.: Vicenza
Città: Vicenza


3 Messaggi

Inserito il - 21 aprile 2008 : 09:49:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Sognatrice Invia a Sognatrice un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ho capito, grazie 1000

ciaoo
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