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Sognatrice
Nuovo Arrivato

Prov.: Vicenza
Città: Vicenza
3 Messaggi |
Inserito il - 20 aprile 2008 : 18:43:48
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Ciao ragazzi! ho appena iniziato a fare immunofluorescenza su tessuti paraffinati e secondo il protocollo dopo il trattamento con pentola a pressione per denaturare le proteine e poi con tripsina...devo fare un bagno con NH4Cl 50mM, xchè? qual' è la sua funzione?
ciaoo
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la_fra
Utente
 

750 Messaggi |
Inserito il - 20 aprile 2008 : 23:20:52
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serve per bloccare le aldeidi, come si usa l'H2O2 per bloccare le perossidasi endogene |
Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire) |
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la_fra
Utente
 

750 Messaggi |
Inserito il - 20 aprile 2008 : 23:27:28
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suppongo che se si fa il blocco delle perossidasi endogene quando si utilizza un sistema di rivelazione basato su perossidasi (che senza il blocco darebbe colorazioni aspecifiche) nel tuo caso il sistema si basi su aldeidi, o in qualche altro passaggio ci sia comunque interferenza delle aldeidi libere che è preferibile evitare. nello specifico non so |
Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire) |
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Dionysos
Moderatore
  

Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 21 aprile 2008 : 00:52:26
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Probabilmente fissi con formaldeide, e la blocchi con NH4Cl per evitare che la formaldeide residua vada a fissare pure gli anticorpi. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà (F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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Sognatrice
Nuovo Arrivato

Prov.: Vicenza
Città: Vicenza
3 Messaggi |
Inserito il - 21 aprile 2008 : 09:49:24
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ho capito, grazie 1000
ciaoo  |
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