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SerenaS
Utente Junior

211 Messaggi

Inserito il - 24 aprile 2008 : 09:49:30

Ciao
Parliamo di cromatografia.
Ho preso appunti dalla lezione ma mimancano alcune parti.Qualcuno mi pu� aiutare?

Se la composizione della fase mobile rimane sempre le stessa per l'intera analisi si parla di cromatografia isocratica,ma se si vuole lavorare in gradiente di ph,come si fa a creare questo gradiente di ph?
Io ho scritto che bisogna utilizzare due contenitori:uno con.............e una seconda bottiglia con soda 14M.I due contenitori sono separati e devo lavorare con pH da 0 a 14.Insieme all'HCl deve entrare la soda:prima che la fase mobile entri nella colonna c'�...............
Se si lavora invece in gradiente di polarit�,come si crea questo gradiente?
Grazia a todos

Serena

SII IL LUSSO DI TE STESSO

123Vale
Nuovo Arrivato

57 Messaggi

Inserito il - 24 aprile 2008 : 18:43:31

Ciao, tu crei il gradiente ma non � detto che lavori con tutta la scala del ph, dipende il range del ph dal tipo di proteine da separare. Il gradiente pu� essere "creato" manualmente prendendo il contenitore A e quello B collegati da un capillare e ciascuno dei due contenitori ha un proprio rubinetto. In pi� il capillare che unisce i due contenitori termina in un altro contenitore di raccolta che"gocciola"sulla tua colonna cromatografica.
Inizi aprendo il rubinetto A, scender� soluzione solo A con il suo ph sulla tua colonna, dopo un certo tempo apri il rubinetto B, scender� liquido B con ph diverso dalla A; sopra la tua colonna arriver� del liquido che sar� 99%A e 1%B e man mano che si procede le % varieranno finch� avrai sulla colonna solo 100%B.Cos� avrai creato il tuo gradiente di ph. Ora per� il gradiente non lo si fa manualmente, ma viene fatto variare da particolari software.

max2612
Nuovo Arrivato

11 Messaggi

Inserito il - 24 aprile 2008 : 19:11:46

per creare il gradiente di polarit� si fa sempre come ha detto 123 vale ma usi solventi diversi con caratteristiche polari e apolari.