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Messaggio inserito da biomarco

1. Un vettore utilizzato nel clonaggio di un frammento di dna digerito se lo recupero da gel che forma assumerà? ad anello con un nick, triplo filamento, singolo, lineare, superavvolto?

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2. Nell'amplificazione di una sequenza Alu con primer esterni nella reazione di pcr si ottengono 3 bande si può che l'evento + probabile sia:idivid triplo eterozig, 2. ci sia contaminazione del dna 3.la terza banda sia un prodotto aspecifico della reazione 4. un primer si appaia in un'altra regione di dna 5.non si ha inserito la Taq nella reazione.???

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Questa non l'ho capita molto bene
Comunque la cosa più plausibile mi sembra le presenza di un prodotto aspecifico, e ovviamente se ho aspecifico è perchè i primer si appaiano in un'altra regione! (la 4 forse è da escludere perchè dice 1 solo primer si appaia in un'altra regione... )
Sicuramente non è l'assenza della Taq altrimenti non avresti non avresti amplificazione!

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3. Se trasformiamo delle cellule batteriche con 10ng di vettore e otteniamo 1000 colonie, la competenza è di:
a.) 10^7 b.) 10^6 c.) 10^5 d.) 10^ 4 e.) 10^3 ???

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4. Con quali e quante bande si presenta un plasmide estratto da batteri in un gel d'agarosio se l'estrazione comporta la presenza di un nick?
1 2 3 4 5 ????

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Messaggio inserito da biomarco

Lo so che sono poco chiare queste domande ma non so dove a andare a pescare le risposte!ci dev'essere qualcuno che le sa..

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Messaggio inserito da biomarco

...solo non ho capito bene l'ultima, le risposte presenti dunque non centrano con la domanda (potrebbe anche essere, non mi meraviglierei!)

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Un frammento che deve essere legato ad un vettore deve possedere:
a.)5' OH
b.)fosfato al 5'
c.)fosfato al 3'
d.)3' senza OH
e.)5' COOH

Io penso fosfato al 5'...

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Un vettore DEFOSFORILATO rispetto ad un NON defosforilato avrà le seguenti probabilità di richiudersi in una reazione di ligazione e trasformazione:
a.)maggiori
b.)minori
c.)uguali
d.)comunque pari al 100%
e.)comunque pari a 0

io direi la b

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Nel clonaggio di un gene mediante pcr si usa aggiungere delle basi al 5' del primer utilizzato per:
a.)facilitare l'amplificazione
b.)facilitare la successiva digestione con enzimi di restrizione
c.)facilitare la trasformazione batterica
d.)facilitare la reazione di ligazione
e.)facilitare il recupero da gel del frammento

io penso la b

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Subclonare un gene mediante pcr consente di:
a.)aggiungere al gene i siti di restrizione desiderati
b.)amplificare per pcr il vettore
c.)digerire il gene con i siti di restrizione al suo interno
d.)utilizzare la Taq per il clonaggio

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Mah... anche questa mi sembra un po’ strana.
b.)amplificare per pcr il vettore --> Di certo non amplifichi il vettore per pcr, ma il frammento che ti interessa!
a.)aggiungere al gene i siti di restrizione desiderati --> Puoi aggiungere dei siti di restrizione
c.)digerire il gene con i siti di restrizione al suo interno --> la digestione però la fai dopo la PCR... se hai inserito dei siti di restrizione poi ovviamente digerirai... ma non all'interno del gene!!!
d.)utilizzare la Taq per il clonaggio --> non è detto che tu faccia la PCR con la Taq, puoi usare altre polimerasi, meglio se con attività di proof-reading!
Quindi la più plausibile mi sembra la a