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rico
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
 Inserito il - 08 luglio 2008 : 12:02:04
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ciao raga sopete mica dirmi perchè la sds page non si può far correre indefinitamente come la IEF? grazie
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frau_frosch
Utente Junior
Città: Boston
225 Messaggi |
 Inserito il - 09 luglio 2008 : 10:31:45
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Nell'isoelettrofocusing le proteine si muovono finchè non arrivano alla regione del gel in cui trovano un pH pari al loro punto isoelettrico: a questo punto, per definizione di punto isoelettrico, la proteina ha carica netta nulla e quindi non si muove in campo elettrico.
Questo significa che puoi lasciar correre indefinitamente ma la proteina non scenderà più.
Nella SDS PAGE, invece, le proteine sono denaturate dall'SDS che conferisce loro una carica uniforme negativa, uguale per tutte le molecole: tale carica muove tutte le proteine verso il polo positivo. Questo significa che le proteine non si fermano mai nel gel, in virtù di tale eccesso di carica superficiale, e quindi se continuassi la corsa potresti perdere proteine, partendo da quelle a minor peso molecolare.
Per questo viene utilizzato un indicatore del fronte di migrazione come il Laemmli loading dye (che contiene blu di bromofenolo): in questo modo tieni sotto controllo il fronte ed eviti di perdere materiale! |
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biotech
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
170 Messaggi |
Inserito il - 14 luglio 2008 : 22:55:06
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| Esatto ,se tu fai correre indefinitivamente il gel di acrilammide le proteine escono quando arrivano alla fine del gel. perchè durant ela corsa non perdono mica l'SDS, per cui la loro carica rimane. Nell IEF ,quando arrivano al loro pI, la carica diventa nulla e quindi si fermano. |
http://boincstats.com/signature/user_1342603.gif |
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corsa dell ief e della sds page
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