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Autore

Discussione

FraM
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 21 luglio 2008 : 11:43:40

Salve, sono un nuovo arrivato, sia del forum che delle tecniche di biologia molecolare. Ultimamento mi sono trovato ad usare un kit di amplificazione con la Taq GOLD. Mi chiedevo perch� alcuni lavori parlano dell'aggiunta di cera nella reazione? a volte sembra che vada aggiunto un tappo per separare la mix di reazione dalla Taq? ho capito male? come va ottimizzato questo kit (va usato tal quale o va preso qualche accorgimento)? GRAZIE A TUTTI

cin
Utente Junior

Prov.: Padova
Citt�: Padova

558 Messaggi

Inserito il - 24 luglio 2008 : 16:15:10

Che io sappia non richiede nulla del genere, la si mette nella mix con i primers ed il campione

SerenaS
Utente Junior

211 Messaggi

Inserito il - 24 luglio 2008 : 20:37:23

Io sapevo che viene fatto ci� per evitare di avere dei falsi positivi..ovvero, data l'alta sensibilit� della PCR, proprio per evitare di avere dei falsi positivi, si pu� preparare tutta la mix della miscela di PCR ed aggiungere la Taq polimerimasi appena prima di iniziare il ciclo per evitare che cominci a polimerizzara dall'inizio dando cos� un risultato il pi� esatto possibile.
E' lo stesso ragionamento di quando si usa un complesso polimerasi/anticorpo anti-polimerasi che si disattiva alle alte Temperature, liberando cos� la polimerasi che pu� iniziare la sua attivit� di sintesi.

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