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Autore Discussione  

mikeee
Nuovo Arrivato



18 Messaggi
Inserito il - 05 agosto 2008 : 13:11:03  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mikeee Invia a mikeee un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti!
ho bisogno di un piccolo parere. dopo una prima reazione RT-PCR di 25 cicli mi sono accorto che questi sono insufficienti, quindi ho provato a far ripartire la reazione per altri 3 cicli aggiuntivi. (con volume ridotto alla metà) il risultato che ottengo è attendibile? alla fine la concentrazione dei reagenti resta invariata..

elly_
Utente Junior

brain blu



400 Messaggi
Inserito il - 05 agosto 2008 : 14:03:44  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di elly_ Invia a elly_ un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
credo di si', si fanno pcr anche diluendo 1:5
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Dionysos
Moderatore

D

Città: Heidelberg


1913 Messaggi
Inserito il - 05 agosto 2008 : 19:43:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dionysos  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Dionysos Invia a Dionysos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Secondo me 'attendibile' è una parola grossa: diciamo che ti può
essere utile per capire qual'è il numero di cicli più adatto.
Poi però, fossi in te, ripeterei la PCR per avere un risultato
più "pulito" o quantomeno più certo. E' vero che la concentrazione
resta invariata, ma questo come dice elly non è importante: piuttosto
avendo prelevato del volume hai sicuramente aumentato la probabilità
di contaminazione, degradazione del prodotto ecc. Insomma se cerchi un
risultato attendibile al 100%, dovresti fare la PCR daccapo dopo aver
individuato il numero di cicli sufficiente.
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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mikeee
Nuovo Arrivato



18 Messaggi
Inserito il - 06 agosto 2008 : 16:47:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di mikeee Invia a mikeee un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie!...nonostante sembra essere venuta bene la ripeterò!
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