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VT
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 07 agosto 2008 : 15:37:43  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di VT Invia a VT un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!!!
dopo un mese di tentativi, mi arrendo e chiedo aiuto..
Sto cercando di estrarre RNA da macrofagi intratumorali CD11b positivi, estratti con le biglie magnetiche della miltenyi. La vitalità delle cellule è abbastanza buona (82,59% di cellule di vive dopo lettura citofluorimetrica) ma l'rna estratto è, lasciatemelo dire, una schifezza. Per lo più è degradato e la miglior purezza che sono riuscita ad ottenere è 1,45..
Mi chiedo quindi:
1) devo mettere i macrofagi in coltura prima del'estrazione?
2) le biglie magnetiche interferiscono con l'estrazione?
lo so che siamo in agosto, ma se qualcuno legge questo messaggio ne sarei veramente contenta!
Grazie mille

cin
Utente Junior

ptero

Prov.: Padova
Città: Padova


558 Messaggi

Inserito il - 26 agosto 2008 : 09:14:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cin Invia a cin un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Prova a cambiare metodo estrattivo,a noi l'estrazione di RNA su tutti i tipi di cellule che usiamo viene bene, la qualità è ottima, usiamo un kit della Qiagen, ma anche altri davano buoni risultati; i problemi ci sono con i tessuti, ma non di certo con le cellule.
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