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 Colorazione cellula mitotica
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Elsar
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15 Messaggi

Inserito il - 19 agosto 2008 : 17:38:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Elsar Invia a Elsar un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti. C'è qualcuno che saprebbe dirmi quali sono i coloranti utilizzati per colorare in rosso l'actina e verde i microtubuli quando analizziamo una cellula in mitosi?
Grazie a tutti anticipatamente

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 19 agosto 2008 : 17:58:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Mah, immagino si usino anticorpi marcati... puoi usare i coloranti che vuoi tu. Chessò Texas Red oppure rodamina per il rosso e Oregon Green per il verde, tanto per dirne qualcuno. Puoi anche farlo rosso e blu o giallo e verde volendo!

Guarda qui ad es.:
http://probes.invitrogen.com/servlets/spectraviewer

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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8398 Messaggi

Inserito il - 20 agosto 2008 : 01:19:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Beh di solito più che un anticorpo per marcare l'actina si utilizza falloidina marcata (fluorescente), la falloidina si lega solo ai filamenti di actina e non all'actina libera; per la tubulina invece si utilizzano anticorpi.
E' vero che puoi poi scegliere i colori che vuoi, però i colori più utilizzati sono rosso e verde.
In genere nelle cellule si usa falloidina rossa e anti-tubulina verde (in realtà è l'anticorpo secondario che è arcato in verde), il motivo esatto della scelta di questi 2 colori e non il contrario non lo so, però in effetti l'actina si vede meglio nelle cellule con il rosso!
Infine di solito si utilizza anche il DAPI (blu) per colorare i nuclei, sopratutto se si tratta di cellule in mitosi!

Questi sono un po' di esempi di immagini prese in internet.





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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 20 agosto 2008 : 08:38:24  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ok, quella della falloidina mi mancava :)

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