uso fosfatasi alcalina?

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liciageno
Nuovo Arrivato

107 Messaggi

Inserito il - 16 settembre 2008 : 19:22:15

Ciao,
vorrei sapere perch� in un clonaggio di un frammento di DNA in un plasmide, � necessario introdurre la fosfatasi alcalina, una volta che si � digerito con l'enzima di restrizione e che si sono generate le estremit� coesive. Potete darmi una spiegazione?
Grazie

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 16 settembre 2008 : 20:01:37

La fosfatasi alcalina elimina il fosfato presente sul plasmide, e impedisce che il plasmide si richiuda su se stesso vuoto. Per chiudersi deve per forza esserci il gene di interesse (col fosfato presente).

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...

max power
Nuovo Arrivato

4 Messaggi

Inserito il - 04 novembre 2009 : 23:04:01

tu vai a fare la defosforilazione su di un vettore digerito con enzimi di restrizione x favorire poi la ligazione dell'inserto. se non sono presenti i gruppi fosfato al 5' del vettore questo nn si pu� ricircolarizzare