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Discussione

MatAr
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 26 settembre 2008 : 10:36:44

salve a tutti!

avrei una semplice domanda da porre: la quantit� di plasmide utilizzato per trasformare cellule competenti pu� influire sull'efficienza di trasformazione? ovvero, esiste un limite nella qt� di plasmide da utilizzare o � meglio usarne sempre un eccesso?

grazie

morgan79
Utente Junior

Prov.: Bari

143 Messaggi

Inserito il - 27 settembre 2008 : 13:13:54

che io sappia un nanogrammo di plasmide � sufficiente ad ottenere colonie se le cellule competenti sono veramente competenti. Se eccedi con le quantit� di plasmide (sempre nel caso delle cellule veramente competenti) hai una piastra confluente da cui non riesci a distinguere la singola colonia.
Se hai problemi con la trasformazione controlla che nelle piastre usi l'antibiotico giusto oppure la qualit� delle tue cellule competenti e ricorda che quelle con calcio cloruro rimangono competenti per 4-5 gg a 4 gradi e quelle rese competenti con TFB1 e TFB2 sono molto pi� efficienti e le devi conservare a -80 gradi

il sapere non � sufficiente, bisogna applicare; il volere non � sufficiente, bisogna fare

MatAr
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 28 settembre 2008 : 13:01:03

bene ti ringrazio.

era un piccolo dubbio che mi sono portato per una settimana...

ciao