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biologomolecolare84
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DNA
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Inserito il - 17 novembre 2008 : 17:15:43  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti...chiedo aiuto a voi che sicuramente ne saprete più di me!ho un esame da dare a breve e mi servirebbe capire le differenze tra lampada ad arco, laser a gas e a semiconduttori, lampade alogene lampade non a filamento e lampade a incandescenza e soprattutto perchè alcune sono più utile per un certo tipo di microscopia mentre altre per altri tipi di microscopia...grazie dell'aiuto!!!

PS: Accetto anche link, materiale e qualsiasi cosa che possa farmi comprendere!!!

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


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Inserito il - 17 novembre 2008 : 17:35:32  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Beh, la grossa differenza è il tipo di luce che ti danno. Ad esempio un laser ti dà (più o meno) una sola lunghezza d'onda, una lampada ad arco ti dà uno spettro piuttosto grande di lunghezze d'onda.

Ad es. se la tua lampada emette solo nel visibile e il tuo colorante deve essere eccitato nell'UV non andrà bene. La considerazione di base da fare è semplicemente questa.

Se poi vuoi info sui vari tipi di lampade basta fare una ricerca su Google (magari in inglese) con il nome della lampada e ti vengono fuori migliaia di pagine

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biologomolecolare84
Nuovo Arrivato

DNA

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Inserito il - 19 novembre 2008 : 12:40:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie mille...ho visto che il corso di Tecniche Fisiche In Biologia ha creato un pò di problemi anche ad altri utenti...ma perchè dovremmo sapere tutte queste cose?cmq farò una ricerca più approfondita!Grazie ancora!
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


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Inserito il - 19 novembre 2008 : 18:50:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Perchè quando vuoi fare qualche foto con un microscopio non è esattamente così ovvio, proprio per questi problemi.
E' necessario sapere come si comporta la tua lampada in modo ad es. da usare i giusti fluorofori per il tuo esperimento.

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biologomolecolare84
Nuovo Arrivato

DNA

Prov.: Rm
Città: Roma


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Inserito il - 19 novembre 2008 : 19:28:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie...è solo che il prof chiede cose ( a mio avviso) troppo tecniche...della serie:
1. perchè non si usa una lampada ad incandescenza per il microscopio a fluorescenza?
2. qual è il vantaggio invece di usare una lampada ad arco?

boh...non so, forse sono io troppo ignorante!
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


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Inserito il - 19 novembre 2008 : 19:31:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
No, ma non ti preoccupare, è normale che quando studi queste cose ti sembrino inutili, ci siamo passati tutti!

Conta che a noi all'uni queste cose non le hannno mai insegnate, quindi me le sono dovute studiare da solo su libri e articoli quando ne ho avuto la (abbastanza forte) necessità in laboratorio.

Per rispondere alle tue domande:

Le lampade a incandescenza hanno emissione massima attorno ai 600nm (anche se generano luce tra i ~300nm e i ~1000nm) e molti fluorofori devono essere eccitati a lunghezze d'onda più basse. Inoltre le lampade ad arco sono caratterizzate da picchi molto alti di emissione che possono essere facilmente filtrati per dare un'eccitazione più selettiva del tuo campione.
Ad es. le lampade ad arco al mercurio hanno picchi di emissione a 313, 334, 365, 406, 435, 546, e 578nm.
Le lampade ad arco allo xenon mancano di questi picchi ma hanno un range molto più largo di emissione con lo svantaggio che costano un botto... (se non ricordo male l'ultima volta che ne ho comprata una veniva ~1000 US$).

Comunque questa pagina spiega tutto nel dettaglio
http://www.microscopy.fsu.edu/primer/anatomy/sources.html

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biologomolecolare84
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DNA

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Inserito il - 19 novembre 2008 : 19:48:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ti ringrazio...sei stato molto gentile...speriamo bene per questo esame!!!
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biologomolecolare84
Nuovo Arrivato

DNA

Prov.: Rm
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Inserito il - 20 novembre 2008 : 10:04:40  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
chick80 posso chiederti un'ultima cosa?

Il prof ha parlato di sonde organiche ed inorganiche. Tra le sonde organiche ha citato il FITC, sottolineando il fatto che questo fluorocromo non deve cambiare le sue proprietà di fluorescenza a seconda dell'ambiente circostante; e le sonde Fura-2, Fluo-3, Fura-Red, che invece, devono cambiare le loro proprietà di fluorescenza a seconda dell'ambiente che le circonda, altrimenti non sarebbe possibile rilevare la concentrazione di Ca+2 (servono proprio a questo).

E' giusto considerarle comunque tutte sonde organiche?

Un esempio di sonda inorganica è rappresentata dai Quantum Dots?

Grazie ancora.
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chick80
Moderatore

DNA

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Inserito il - 20 novembre 2008 : 11:03:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Guarda, sinceramente non ho mai sentito questa distinzione fra sonde "organiche" e "non organiche"... però il tuo ragionamento mi sembra corretto, visto che i quantum dots sono colloidali inorganici di cadmio o indio se non ricordo male.

Citazione:
che invece, devono cambiare le loro proprietà di fluorescenza a seconda dell'ambiente che le circonda,

Queste sonde vengono generalmente chiamate "indicatori".

Di solito, almeno per gli indicatori, si parla di sonde "chimiche" o "sintetiche" (Fura, Calcium Green, Fluo etc) e di sonde "proteiche" o "geneticamente codificate" (es. Pericam e Cameleon per il calcio o Clameleon per il cloro).

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biologomolecolare84
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DNA

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Inserito il - 20 novembre 2008 : 13:21:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
beh si..lui ha parlato di sonde organiche e inorganiche...e credo che l'unica cosa a cui potesse riferirsi (per sonde inorganiche) è il quantum dot (o quantum dots al plurale.

Si ha parlatato anche dei costrutti Camaleon definendoli come costrutti che cambiano conformazione.

Grazie ancora.
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


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Inserito il - 20 novembre 2008 : 15:40:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Nota che Cameleon, Pericam & Co. sono proteine.

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biologomolecolare84
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Inserito il - 20 novembre 2008 : 17:54:48  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biologomolecolare84 Invia a biologomolecolare84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
si si lo immaginavo! :D
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