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enzima
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 16:51:02

ciao a tutti iscritta da poco, avrei bisogno di aiuto...ho indotto l'autofagia in cellule HeLa utilizzando del terreno privo di siero e amminoacidi, ho fatto un wb per controllare l'andamento della proteina LC3 (marcatore dell'autofagia), ho avuto il segnale. In seguito ho rifatto pi� volte l'esperimento, cambiando diversi parametri, ma non ho avuto pi� alcun segnale...non so da cosa possa dipendere.
Grazie

jazz84
Nuovo Arrivato

19 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2011 : 17:34:00

Ciao,
anch'io sono nuova e lavoro da poco con linee cellulari immortalizzate. La tua domanda mi ha molto incuriosito perch� ultimamente,ho avuto lo stesso problema.
La causa era che le mie cellule avevano subito troppi passaggi e questo aveva modificato la loro risposta al trattamento; per farla breve ho riscongelato una nuova aliquota

Non so se questo pu� aiutarti,
let me know
Ciao

enzima
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2011 : 12:28:56

ho fatto diverse prove tra cui scongelare una nuova aliquota di cellule ma non ho risolto nulla...il segnale � praticmente scomparso...posso chiederti che tipo di anticorpo usi e a che diluizione?