saturazione in test ELISA

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Autore

Discussione

elisa979
Nuovo Arrivato

Prov.: Genova
Città: Genova

2 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2006 : 13:43:14

ciao a tutti! sono nuova e non so ancora bene come muovermi all'interno del forum...cmq ci provo!
vorrei sapere se qualcuno può suggerirmi un metodo alternativo alla BSA per saturare le piastre dopo aver fatto il coating x fare un test ELISA. Normalmente uso la BSA al 3% ma per i tipi di esperimenti che sto facendo ultimamente non posso più usarla...x ciò vorrei sapere se qualcuno ha già provato qualche altro metodo o se ha semplicemente delle idee
grazie!

Elisa

Fil23
Utente Junior

Prov.: estero
Città: London

238 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2006 : 16:31:27

Ciao,
io l'ELISA l'ho fatto solo in una esercitazione di laboratorio...cmq in quell'occasione ci fecero usare latte in polvere per la saturazione! Che dite è una procedura barbara o funziona bene?
ciao ciao

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2006 : 16:53:16

Mi sembra che si possa usare anche l'FCS o FBS!
Penso che si possa usare anche il latte in polvere ma non sono espertissima di ELISA!!!

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 30 novembre 2006 : 20:35:12

Alla fine quello che conta è che ci siano un sacco di proteine in giro.
Alcuni anticorpi si saturano meglio con BSA, altri con latte in polvere, altri con siero, ma alla fine più o meno è lo stesso (anche perchè ad es. il siero è fatto per gran parte di BSA e anche il latte ne contiene alta %).

La BSA di solito è meglio per i monoclonali e il latte per i policlonali, ma conviene fare un paio di prove. Io per il western li usavo entrambi al 5% in TBS-T, non ho mai fatto un'ELISA quindi non ti so dire nulla a riguardo.

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elisa979
Nuovo Arrivato

Prov.: Genova
Città: Genova

2 Messaggi

Inserito il - 01 dicembre 2006 : 14:29:36

grazie per i consigli ma il mio problema è dovuto al fatto che non voglio usare l'albumina...e purtroppo sia siero che latte ne hanno un bel po'!