Mutagenesi

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Flussi e riflussi. Indagine sull'origine di una teoria scientifica
Lucio Russo

Biochimica sistematica umana. Con CD-ROM
Autori Vari

Storia del pensiero biologico. Diversità, evoluzione, eredità
Ernst Mayr

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

Laboratorio

Biotecnologie

Mutagenesi

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biotecnologie:

Siti Scientifici

Protocolli Laboratorio

Glossario

Didattica e Principi

Multimedia

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

vihy_90
Nuovo Arrivato

14 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2012 : 20:38:22

Salve a tutti,
la mia domanda riguarda la mutagenesi e più nello specifico gli approcci utilizzati per effettuare una delezione puntiforme o un'inserzione di una seq. nucleotidica.
Quello che farei io sarebbe creare un oligonucleotide sintetico, complementare alla regione di DNA di interesse e che nel caso delle delezioni sia vuoto in corrispondenza delle basi che voglio eliminare,
viceversa per le inserzioni che abbia invece la seq in piu che voglio inserire.
VI chiedo quindi:
-se è corretto quello che ho scritto (se magari c'è un modo migliore/più tecnico e preciso di esprimerlo) o se ci sono altri metodi alternativi per fare inserzioni/delezioni ;
-e soprattutto COME FACCIO SE volessi fare una delezione/inserzione di una regione più ampia es di 1 Mpb
GRAZIEEEEEEEEEE IN ANTICIPO!!!

vihy_90
Nuovo Arrivato

14 Messaggi

Inserito il - 02 maggio 2012 : 10:03:07

allora nessuno sa dirmi niente al riguardo?? :(

domi84
Moderatore

Città: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 02 maggio 2012 : 11:05:35

Quello che hai scritto è corretto, e funziona per mutazioni di geni che si trovano su plasmidi.
Per mutazioni più ampie devi fare dei veri e propri clonaggi con pcr, tipo:


gene:
                   zona da eliminare
                   -----------------
---------------------------------------------------------
->               <-                 ->                 <-

------------------                  ---------------------

il primer 2 e 3 devono avere lo stesso sito di clonaggio.

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...