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Roberta0611
Nuovo Arrivato
13 Messaggi |
 Inserito il - 25 giugno 2012 : 13:16:15
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salve,
Malattia autosomica recessiva che comporta perdita di sito restrizione di enzima BamHI. Southern blotting su 2 bambini
Famiglia 1
Padre Madre Figlio
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Famiglia2
Padre Madre Figlio
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-------- -------- --------
allele mutato ---H---H------H---
allele selvatico ---H----------H---
Sonda agisce
qui: ---H--****----H---
Come si svolge l'esercizio? Figlio 1 è malato e figlio 2 è portatore? Sono entrambi malati? entrambi sani? O cosa?
Non ne ho la minima idea. Dove trovare esercizio simile?
Grazie
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JGuardaGliUfo
Utente
Città: Roma
641 Messaggi |
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 14:26:12
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La sonda secondo me l'hai disegnata dtroppo a destra. Deve coprire sia il frammento grande del WT che quello piccolo all'estremità sinistra del mutante.
Ad ogni modo, digerendo con i RE e ibridando con la sonda, hai due pattern:
1) WT : una banda grande, diciamo 3 kb
2) mut: due bande, diciamo 2 kb + 1 kb
Da cio' che disegni, i genitori hanno un allele WT (banda superiore, 3kb) e un allele mutato (due bande inferiori, 2kb e 1kb). cio' vale per i due genitori in entrambe le famiglie.
Invece i figli sono uno omozigote per l'allele WT (famiglia 1; una sola banda di 3kb) e l'altro omozigote per l'allele mut (famiglia 2; due bande di 2kb e 1kb) |
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Roberta0611
Nuovo Arrivato
13 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 16:44:46
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Oh scusa, ho fatto un grave errore.
allele selvatico ---H---H-----H---
allele mutante ---H---------H---
e sonda agisce
qui ---H-****----H---
in tal modo i risultati cambiano, vero? come? |
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Roberta0611
Nuovo Arrivato
13 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 16:48:09
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inoltre, è rilevante che il polo positivo è in basso e quello negativo in alto, vero? e' rilevante ai fini dello svolgimento dell'esercizio?
(i frammenti più lunghi migrano più lentamente e se è così allora ho capito...ma ho sbagliato la domanda d'esame ) |
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JGuardaGliUfo
Utente
Città: Roma
641 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 17:22:18
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In pratica, la mutazione abolisce il sito di restrizione. Quindi, stando alla tua correzione, dovremmo avere una situazione di questo genere (utilizzando le indicazioni di roberta.s):
Citazione:
1) WT : una banda grande, diciamo 3 kb due bande, 2 kb + 1 kb
2) mut: due bande, diciamo 2 kb + 1 kb una banda grande, 3 kb
Famiglia 1: genitori entrmbi con 3 bande, figlio una sola banda. Quale sarà il loro genotipo?
Famiglia 2: entrambi i genitori con 3 bande padre 3 bande, madre 2, figlio 2 bande. Il loro genotipo qual è?
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I could not love except where Death
Was mingling his with Beauty’s breath —
Or Hymen, Time, and Destiny
Were stalking between her and me.
E. A. Poe |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 19:19:48
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C'era un problema con l'allineamento del testo e quindi c'è stato uno spostamento di bande, ora ho sistemato i messaggi di Roberta0611.
J. ho visto che mentre scrivevo questo messaggio hai corretto anche il tuo di conseguenza! 
Roberta0611 per mantenere il testo allineato utilizza il tag "code" #, trovi maggiori indicazioni qui: http://www.molecularlab.it/forum/faq.asp#format |
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JGuardaGliUfo
Utente
Città: Roma
641 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 19:30:52
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Citazione:
Messaggio inserito da GFPina
C'era un problema con l'allineamento del testo e quindi c'è stato uno spostamento di bande, ora ho sistemato i messaggi di Roberta0611.
J. ho visto che mentre scrivevo questo messaggio hai corretto anche il tuo di conseguenza!
Roberta0611 per mantenere il testo allineato utilizza il tag "code" #, trovi maggiori indicazioni qui: http://www.molecularlab.it/forum/faq.asp#format
Grazie GFPina, ho avuto un momento di panico per la banda scomparsa! Quindi, è giusto come lo hai modificato tu? La accendiamo? |
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E. A. Poe |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 25 giugno 2012 : 19:47:33
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Citazione:
Messaggio inserito da JGuardaGliUfo
Grazie GFPina, ho avuto un momento di panico per la banda scomparsa! Quindi, è giusto come lo hai modificato tu? La accendiamo?
Sì è giusto così!
Mi spiace per il momento di panico, in realtà stavo per modificare anche il tuo messaggio, ma sono stata interrotta e non ho fatto in tempo. |
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JGuardaGliUfo
Utente
Città: Roma
641 Messaggi |
 Inserito il - 26 giugno 2012 : 00:11:15
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 Scritto da MolecularLab Mobile
Ah no, tranquilla GFPina! Ho un "momento di panico" è una espressione tipicamente romana (e retorica) che non vuole esprimere uno stato di agitazione in sè :). Di solito, l'espressione facciale collegata alla frase è piuttosto buffa e rilassata! |
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E. A. Poe |
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 26 giugno 2012 : 09:55:52
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Citazione:
Messaggio inserito da Roberta0611
inoltre, è rilevante che il polo positivo è in basso e quello negativo in alto, vero? e' rilevante ai fini dello svolgimento dell'esercizio?
(i frammenti più lunghi migrano più lentamente e se è così allora ho capito...ma ho sbagliato la domanda d'esame )
Scusa, ma se il DNA è carico negativamente, come farebbe a migrare in altro modo che non dal polo negativo a quello positivo? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2012 : 00:13:22
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Citazione:
Messaggio inserito da roberta.s
Scusa, ma se il DNA è carico negativamente, come farebbe a migrare in altro modo che non dal polo negativo a quello positivo?
Beh certo migra verso il polo positivo, ma non è detto che sia in basso, dipende da come è orientaro il gel!
Se ti stai chiedendo se c'è qualcuno che fa migrare i gel al contrario... purtroppo sì! A me è capitato nel lab dove ho fatto la tesi, i pozzetti erano in basso e i gel li facevano migrare verso l'alto! Mi facevano impazzire e non ti dico il casino per sistemare le foto da mettere nella tesi!!!
Comunque per tranquillizzare roberta0611, non ti preoccupare a parte casi di laboratori strani i gel migrano verso il basso!  |
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roberta.s
Utente Junior
Città: Parigi
564 Messaggi |
Inserito il - 27 giugno 2012 : 09:26:13
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| OMG! Questa proprio mi mancava! Per la serie come complicarci la vita ! :S |
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southern blotting e diagnosi
